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纳米小孢子菌PCR检测试剂盒反应五要素

发表时间:2021-04-06
纳米小孢子菌PCR检测试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒 ,英文名: CagA ELISA Kit
细胞毒素(CTX)ELISA试剂盒 ,英文名: CTX ELISA Kit
细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒 ,英文名: IAP ELISA Kit
细胞凋亡相关斑点样蛋白(PYCARD)ELISA试剂盒 ,英文名: PYCARD ELISA Kit
胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒 ,英文名: GCA ELISA Kit
特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒 ,英文名: SMAF ELISA Kit
糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒 ,英文名: GlyCAM-1 ELISA Kit
髓性细胞核分化抗原(MNDA)ELISA试剂盒 ,英文名: MNDA ELISA Kit
髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒 ,英文名: TREM-1 ELISA Kit
髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒 ,英文名: MPO-ANCA IgG ELISA Kit
酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒 ,英文名: aFGF-1 ELISA Kit
酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)ELISA试剂盒 ,英文名: aFGF/FGF-1 ELISA Kit
酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)ELISA试剂盒 ,英文名: aFGF ELISA Kit
鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒 ,英文名: ECF ELISA Kit
嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 ,英文名: ECP ELISA Kit
嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒 ,英文名: Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit
视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒 ,英文名: pRB ELISA Kit
神经细胞粘着分子(NRCAM)ELISA试剂盒 ,英文名: NRCAM ELISA Kit


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