Ach 大鼠乙酰胆碱ELISA检测试剂盒试剂配制
发表时间:2024-11-27
Ach 大鼠乙酰胆碱ELISA检测试剂盒试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。在正式进行Ach大鼠乙酰胆碱ELISA检测前,还需进行以下关键步骤以确保实验的准确性和灵敏度:
11、洗涤液配制:将浓洗涤液按照1:25的比例与蒸馏水混合均匀,确保每孔洗涤时能有足够的洗涤液覆盖并彻底去除未结合的残留物,此步骤对于减少背景噪音至关重要。
12、标准品系列稀释:将两瓶冻干标准品分别溶解于指定体积的样品稀释液中,并按照说明书的推荐浓度梯度进行系列稀释,以建立标准曲线,便于后续样本结果的定量分析。
13、抗体工作液准备:取适量生物素标记抗体和辣根过氧化物酶标记亲和素,分别用其对应的稀释液按照1:100的比例稀释至工作浓度,轻柔混匀,避免产生气泡,影响加样精度。
14、实验前准备:将所有试剂(包括已稀释的洗涤液、标准品系列、抗体工作液等)预热至室温,确保实验条件的一致性。同时,检查酶联板无破损,孔间无污染,为接下来的加样步骤做好准备。
至此,Ach大鼠乙酰胆碱ELISA检测试剂盒的所有试剂配制及准备工作已完成,接下来即可按照说明书指示的步骤进行加样、孵育、洗涤、显色及终止反应等操作,最终通过酶标仪读取数据,进行结果分析。