Origami(DE3) 感受态细胞-上海帛科生物技术有限公司

Origami(DE3) 感受态细胞

起订量 (瓶)价格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

产地：进口、国产

货号：BK-G63278

发布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-12-27

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产品详请

产地	进口、国产
保存条件	低温冷藏
品牌	帛科
货号	BK-G63278
用途	产品仅用于科研
组织来源	详见说明书
细胞形态	详见说明书
是否是肿瘤细胞	否
CAS编号
保质期	详见说明书
器官来源	详见说明书
免疫类型	详见说明书
品系	详见说明书
生长状态	详见说明书
物种来源	详见说明书
包装规格	100ul10 100ul50
纯度	%
是否进口	是

规格参数：

产品名称：Origami(DE3) 感受态细胞
规格：100ul*10 100ul*50
分类：表达感受态细胞
用途：生化试剂（用于科研试验研究）
储存条件: -70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。
外观:（性状）干冰运输，单加10kg干冰费
单位: 袋

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

正十九烷（标准品）质量规格：内标 N-NONADECANE Rat dehydroepiandrosterone S7 (DHEA-S7) ELISA Kit 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 HumanHydroxy-Pyridiniumcrosslinks,OH-PYDELISA试剂盒人羟基胶原交联(OH-PYD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

木蝴蝶苷B（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Oroxin B Humanesogen,EELISAKit 人雌激素(E)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanMannose，MNELISAKit人甘露糖(MN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1霉素氨丁三醇质量规格：>98%,BRFosfomycin tromethamine HumanCollageypeⅢ,ColⅢELISA试剂盒人Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 大鼠紧张素Ⅰ转化酶(ACE)ELISA试剂盒，英文名： ACE ELISA Kit

1霉素氨丁三醇(标准品)质量规格：含量测定Fosfomycin tromethamine 组织5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量检测试剂盒20 人血吸虫(schistosoma)ELISA检测试剂盒humanschistosomaELISAKit 96T/48T

小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(PM4)ELISA试剂盒，英文名： PM4 ELISA Kit 1358-76-5钩吻素子说明书 Koumine

犬前体蛋白(TpP)ELISA检测试剂盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T 77-92-9枸橼酸品牌 Citric Acid

犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)试剂盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit 546-97-4古伦宾规格 Columbin

英文名称humanHistamineELISAKIT人组胺(Histamine)规格：96T/48T 882664-74-6瓜子金皂苷己 Polygalasaponin F

超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5 光翠雀碱说明书 denudatine

60976-49-0老鹳草素品牌 Geraniin 猪转铁蛋白(TF)试剂盒 Pig ansferrin,TF ELISA Kit

60-82-2根皮素 Phloretin 猪转录因子AP-1 试剂盒 Pig anscription Factor/Activator Protein 1,AP-1 ELISA KIT

60-82-2根皮素 Phloretin 猪转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 Porcine TGF-β1 ELISA Kit

60-81-1根皮苷规格 Phlorizin 猪转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T

Origami(DE3) 感受态细胞6080-33-7盐酸青藤碱品牌 Sinomenine 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA检测试剂盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 96T/48T