BL21(DE3) 感受态细胞-上海帛科生物技术有限公司

BL21(DE3) 感受态细胞

起订量 (瓶)价格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

产地：进口、国产

货号：BK-G63267

发布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-12-27

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产品详请

产地	进口、国产
保存条件	低温冷藏
品牌	帛科
货号	BK-G63267
用途	产品仅用于科研
组织来源	详见说明书
细胞形态	详见说明书
是否是肿瘤细胞	否
CAS编号
保质期	详见说明书
器官来源	详见说明书
免疫类型	详见说明书
品系	详见说明书
生长状态	详见说明书
物种来源	详见说明书
包装规格	100ul10 100ul50
纯度	%
是否进口	是

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数：

产品名称：BL21(DE3) 感受态细胞
规格：100ul*10 100ul*50
分类：表达感受态细胞
用途：生化试剂（用于科研试验研究）
储存条件: -70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。
外观:（性状）干冰运输，单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项：

1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

植酸钠质量规格：>98%,BRPhytic acid dodeca salt hydrate 英文名称RatCTELISAKit大鼠降钙素(CT)规格：96T/48T 牛病毒(DV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装

菊粉;菊糖质量规格：>90%,BRInulin from chicory 酵母β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量检测试剂盒20 人相关抗原(TAA)试剂盒 Human tumor-associated aigen,TAA ELISA Kit

固深红 GBC质量规格：BS,90%Fast Garnet GBC Salt ELISAKitDP人脱氧尿三1酸规格：48T/96T 1酯酶C(PLC)ELISA试剂盒，英文名： PLC ELISA Kit

固红 3 GL质量规格：BSFast Red 3 GL Salt 小鼠毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)ELISA试剂盒，英文名： CHRM2 ELISA Kit Ratbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA试剂盒大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Ratglucocoicoidreceptor,GRELISA试剂盒大鼠糖皮质类受体(GR)ELISA试剂盒规格：96T/48T 13657-68-6莪术二酮品牌 Curdione

小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒，英文名： TFR/CD71 ELISA Kit 17910-09-7莪术烯规格 Curzerene

小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA检测试剂盒Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T 474-25-9鹅去氧胆酸 Chenodeoxycholic acid

人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)试剂盒 Human IerferonαAibody,IFNα-Ab ELISA Kit 474-25-9鹅去氧胆酸说明书 Chenodeoxycholic acid

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 516-35-8牛磺鹅去氧胆酸品牌 Taurochenodeoxycholic acid

67920-52-9丹参素钠品牌 Danshensu 组蛋白H3-K79乙酰化检测试剂盒10/20等

67879-58-7单咖啡酰洒石酸品牌 2-Caffeoyl-L-tartaric acid 组蛋白H3-K79(mono/di/i)甲基化检测试剂盒10/20等

6754-58-1黄腐酚 Xanthohumol 组蛋白H3-K64乙酰化检测试剂盒10/20等

66-97-7补骨脂素 Psoralen 组蛋白H3-K56乙酰化检测试剂盒10/20等

6681-18-1氯化木兰花碱品牌 Magnoflorine chloride 组蛋白H3-K56(mono/di)甲基化检测试剂盒10/20等

BL21(DE3) 感受态细胞操作方法：

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。