本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

CEM/C1(人急性细胞细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸D-甘露糖，英文名或英文缩写：D-Mannosamine HC1，级别：高，98%，规格：25毫克

HUtSMC Pellet 人平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人表皮角质细胞-cDNAHEK-acDNA鳞醋硼,水合 BORON PHOSPHcTq 13308-21-2

CL-0098HCT-8(人盲肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×23-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二本基溴化四氮唑噻唑蓝，英文名或英文缩写：MTT，级别：超，99%，规格：500克

RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 二氧化锆，英文名或英文缩写：Zirconium dioxide，级别：5N，规格：25克

人小脑星形胶质细胞裂解物HA-c LNeomycinSulfate 5g/25g/100g INALCO原装
管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)甲基索拉菲尼-d3Sorafenib-methyl-d3质量规格：美国进口

FGF2 Others Human  VEGF121 / VEGF-A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硫康唑Sulconazole质量规格：美国进口

非小细胞;NCI-H20876-羟基6-Hydroxycoumarin质量规格：>98%(GC);进分

CCD-1095Sk细胞，皮肤细胞 细胞,HHCC细胞 CL-0176OP9(小鼠*基质细胞)5×106cells/瓶×2甘氨石胆酸(GLCA)Lithocholylglycine质量规格：美国原装进口

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21匹卡米隆Pikamilone质量规格：>98%,BR
豚鼠胚胎细胞;104C1噻奈普汀钠盐Tianeptine  salt质量规格：>98%,BR

FKBP7 Others Human  PPIase / FKBP7 细胞裂解液 (阳性对照) D-谷氨酰胺D-Glutamine 质量规格：0.98

成纤维细胞完全培养基 100mL扎托布洛芬Zaltoprofen质量规格：>98%

HaCaT细胞，正常皮肤细胞 柰瑟氏菌 小鼠树突状细胞低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP甘胆酸钠 ;甘氨胆酸钠 Glycocholate Hydrate质量规格：>98%

CCL13 Protein Human 重组 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 标签)甘露醇；D-甘露糖醇Mannitol；D-Mannitol质量规格：>99%,BR
STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 多球壳菌素；嗜热菌杀酵母素（来源于无孢霉群）Myriocin from Mycelia sterilia质量规格：≥98%,sigma分装

猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1亚精胺盐酸盐Spermidine tri质量规格：≥98%

BALB/3T3细胞，BALB/C小鼠胚成纤维细胞 人*癌细胞,PC-2细胞 CM-M024小鼠成纤维细胞完全培养基100mL栗精胺Castanospermine质量规格：>98%,进分

大鼠细胞;UMR-106精胺四盐酸盐;盐酸精胺Spermine tetra质量规格：>98%,分子生物学级

CDH1 Others Human 人 Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) D-荧光素钾盐，D-虫荧光素钾盐D-Luciferin potassium质量规格：>98%,BR

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
细小病毒B19 染料法荧光定量PCR试剂盒主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR