公司产品仅用于科研实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
公司产品仅用于科研使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

Anglne细胞，人细胞系 大黄鱼EPC细胞,EPC细胞 上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)MEGA-10N-癸酰基-N-甲基葡糖胺1毫克优质级

Calu-6(人肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2Fmoc-S-三苯甲基-L-... Fmoc-Cys(Trt)-OH,≥99.0% 103213-32-7 5G 通用试剂

HPrSMC Pellet 人类平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人星形胶质细胞cDNAHA cDNA焦鳞醋铁 Fqrric pyrophosphctq 10028-44-3

CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2TRICInepUFFERTRICINE BUFFER超级

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO细胞裂解液 (阳性对照) 硅酮 SE-30SILICONE OV-1
CM-H054成纤维细胞完全培养基100mL乙酸镧五水(>99%,BR)质量规格：>99%,BRLanthanum (III) acetate, pentahydrate

MDA-MB-231, 癌细胞 *瘤,P3-X63-Ag8细胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271]()L-刀豆氨酸硫酸盐(>98%,BR)质量规格：>98%,BRL-Canavanine sulfate salt

小鼠正常肝细胞;NCTC 1469 [NCTC1469]马来酸氟吡汀质量规格：>98%Flupirtine maleate

HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸氟吡汀(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Flupirtine maleate

EB病毒转化的B细胞;KM933氟维司群质量规格：>99%,进分,ER(雌激素受体)拮抗剂Fulvestrant
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7伐地那非-d5Vardenafil-d5质量规格：美国进口

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液) 1mL盐酸贝他定Bestatin 质量规格：美国进口

C2C12, 小鼠肌原细胞 MouseN-去甲基二盐酸三氟拉嗪N-Desmethyl Trifluoperazine Di质量规格：美国进口

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 细胞裂解液 (阳性对照) 双硫仑-d20Disulfiram-d20质量规格：美国进口

内根鞘细胞HHIRSC脱氧胆酸钠盐Deoxycholic Acid,  Salt质量规格：美国进口
人细胞;SF763恩曲他滨Emtricitabine质量规格：>99%,核苷逆转录酶(NRTI)抑制剂

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) 肌酐（标准品）Creatinine质量规格：供检查用

CM-H122人神经星形胶质细胞完全培养基100mL双氯芬酸钾（标准品）Diclofenac Potassium质量规格：含量测定

(+)9811细胞，人细胞 人细胞,SP20细胞 人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF依西美坦（标准品）Exemestane质量规格：含量测定

土拉热弗朗西斯菌染料法荧光定量PCR试剂盒DU 145(人细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸曲美他嗪（标准品）Trimetazidine 质量规格：含量测定