免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-PBEF(NT)
中文名称  内脂素/内脏脂肪素抗体（N端）
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse 
产品类型     一抗
别    名  pre-B-cell colony-enhancing factor 1; PBEF1 protein; AI480535; 1110035O14Rik; AI314458; DKFZP666B131; EC 2.4.2.12; MGC117256; NAmPRTase; NAMPT; Nicotinamide phosphoribosyltransferase; PBEF; PBEF1; Pre B cell colony enhancing factor 1; Pre B cell colony enhancing factor; Pre B cell enhancing factor; Visfatin; NAMPT_HUMAN.
研究领域   心 免疫学 神经生物学 生长因子和激素
蛋白分子量   predicted molecular weight: 55kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PBEF N-terminus
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
产品应用    IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
人巨细胞细胞株;Mo7e胆甲基碳酸酯(>80.0%(GC))Cholesterol Methyl Carbonate质量规格：>80.0%(GC)

TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人细胞裂解液 (阳性对照) 胆乙基碳酸酯(>94.0%(GC))Cholesterol Ethyl Carbonate质量规格：>94.0%(GC)

mCF, 小鼠成纤维细胞胆异丙基碳酸酯(>95.0%(GC))Cholesterol Isopropyl Carbonate质量规格：>95.0%(GC)

NIH3T3细胞，NIH SWISS小鼠胚细胞 人细胞,ALVA细胞 人主动脉平滑肌细胞RNAHASMC miRNA5 μg胆丁基碳酸酯Cholesterol Butyl Carbonate质量规格：

恒河猴肾细胞;RM-2胆异丁基碳酸酯Cholesterol Isobutyl Carbonate质量规格：
EB病毒转化的人B细胞;KM932L-(+)-2-Chloropxenylglycine(S)-2-录本甘酸25克BR，98%

THSD1 Others Mouse 小鼠 THSD1 / TMTSP 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸脱羧酶 (R)-Oxynitrilase (40u/mg) 9024-43-5 500U 通用试剂

CL-0088H4-IIE(大鼠细胞 )5×106cells/瓶×2叶醋水合物 Folic ccid 29-30-3

VEGFA Others Human 人 VEGF / VEGFA / VEGF165 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧-2-扶胞苷，英文名或英文缩写：2-FDC，级别：特，98.5%，规格：25克

人脉络丛成纤维细胞裂解物HCPFL硅酮 OV-275NA
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts DMEM培养基+10%FBS溶菌酶(蛋清)质量规格：2万U/mg,分子生物学级Lysozyme,from egg white

IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白HRP;辣根过氧化物酶质量规格：BR,RZ>2.5,活性>250U/mgPeroxidase, Horseradish(HRP)

NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 SW620(细胞)透明质酸酶质量规格：≥500IU/mg,BR,牛源提取Hyaluronidase

CL-0375L W-3A(小鼠皮下结缔组织细胞)5×106cells/瓶×2N,O-双(叔丁基二甲硅基)乙酰胺(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide

B3GALTL Others Human 人 B3GALTL 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-(二甲基异丙基硅基)咪唑(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole
内脂素/内脏脂肪素抗体（N端）说明书CSF3R Protein Human 重组人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 标签)O6-[4-(氨甲基)苄基]鸟嘌呤质量规格：美国进口O6-[4-(Aminomethyl)benzyl]guanine

TM3(小鼠间质细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]阿糖鸟嘌呤水合物质量规格：美国进口Ara-G hydrate

人心肌细胞裂解物HCML2'-脱氧鸟苷一水合物质量规格：美国进口2'-Deoxyguanosine monohydrate

XRCC5 & XRCC6 Others Human 人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N2-苯氧基乙酰基鸟嘌呤质量规格：美国进口N2-Phenoxyacetyl Guanine

小鼠癌细胞;CCC-Ca761-032-嘌呤质量规格：美国进口2-Mercaptopurine

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