产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4534 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书 | Viral Nervous Necrosis Virus(VNNV)RTPCR | BKP4534 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
特点优势:
1. 特异性:神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
Carvedilol 中文名:卡维地洛 分子式:C24H26N2O4 度:98.0% 金黄地鼠坏死因子α 英文名称: Golden hamster Tumor Necrosis Factor α 规格: 48T/96T 英文缩写: TNFα
5-Aminosalicylic acid 中文名:5-氨基水杨酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Norfloxacin 中文名:诺氟沙星 分子式:C16H18FN3O3 度:98.0% 豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)ElisaKit ELISA. 96T/48T
Indapamide 中文名:吲达帕胺 分子式:C16H16ClN3O3S 度:98.0% 中文名称 方法 规格
Loperamide 中文名:盐酸洛哌丁胺 分子式:C29H34Cl2N2O2 度:98.0% 豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Benzoyl-DL-mine 4703-38-2 中文名:苯甲酰基-DL-蛋氨酸 分子式:C12H15NO3S 度:98.0%
小鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Benzoyl-DL-mine 4703-38-2 中文名:苯甲酰基-DL-蛋氨酸 分子式:C12H15NO3S
小鼠C-肽(mouse C-peptide) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Dioscin 19057-60-4 中文名:薯蓣皂苷 分子式:C45H72O16
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Benzoyl leuco methylene blue 中文名:苄酰基无色亚甲基兰 分子式:C23H23N3OS 度:98.0%
小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit ELISA. 96T/48T Gracillin 19083-00-2 中文名:纤细薯蓣皂苷 分子式:C45H72O17
神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书HEC-1A, 人细胞系硫化锌(>98%, Ind Grade)质量规格:>98%, Ind GradeZinc sulfide
CEM细胞,细胞 人细胞,PC-3M细胞 人肝内胆管上皮细胞总RNAHIBEpiC NA氧化锆(>98%,BC)质量规格:>98%,BCZirconium (IV) oxide
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2氯氧化锆八水(>98%,BC)质量规格:>98%,BCZirconium (IV) oxide chloride octahydrate
AHSG Others Human 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 人细胞裂解液 (阳性对照) 氢氧化锆质量规格:BRZirconium hydroxide hydrate
小鼠周神经成纤维细胞MPNF1酸三戊酯(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Triamyl Phosphate
人绒毛间充质成纤维细胞 HumanBismuth铋粉25克TLC
EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢涤泥相关物质A Cqfdinir Rqlctqd CoMpound c;2(R)-2-[(Z)-2-(2-cMinothiczol-4-yl)-2-(xy7noxyiMino)ccqtcMido]-2-[(2RS,5RS)-5-Mqthyl-7-oxo-2,4,5,7-tqtrcxy7no-1H-furo[3,4-d][1,3]thiczin-2-yl]ccqtic ccid 1784-4-9
人肝细胞cDNAHH cDNATMD-10溴化四乙500毫升AR,99.8%
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) GENEPAGEPLUS5.5%EZSQZ.*CLDPAK5.5% GENE-PAGE PLUS,挤压式瓶装生物技术级10X75MLCOLD
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E(腺苷-5'-二1酸腺苷)
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。