产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4530 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
【产品名称】: 弧菌通用PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Vibrio spp.PCR
【货号】: BKP4530
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
u 存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(最多冻融3次);
u 运输:采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒,也可选择其他合适的核酸提取产品。
组成及试剂配制:
酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
弧菌通用PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Capecitabine 154361-50-9 中文名:卡培他滨 分子式:C15H22FN3O6 Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISA试剂盒人胞浆球蛋白(CIg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 519-98-2 中文名: 分子式:C12H15N3O 组织HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性检测试剂盒20次
Valsartan methyl ester 137863-17-3 中文名: 分子式:C25H31N5O3 HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
α-D-Glucose 492-62-6 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 兔子样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine 35552-76-2 中文名: 分子式:C10H11N3 Rat angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 大鼠生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒
小鼠CXCL1/KC 英文名称: CXC chemokine ligand 1 规格: 48T/96T 英文缩写: CXCL1/KC Benzophenone 中文名:二苯甲酮 分子式:C13H10O
小鼠c-foselisa试剂盒 小鼠c-fos试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠c-fos试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠c-fos试剂盒、小鼠c-foseisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Benzopinacol 中文名:苯频哪醇 分子式:C26H22O2
小鼠c-fosELISAKit ELISA. 96T/48T N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide 27262-40-4 中文名: 分子式:C14H20N2O
小鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Benzoin oxime 441-38-3 中文名:安息香肟 分子式:C14H13NO2
小鼠CD3分子elisa试剂盒 小鼠CD3分子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠CD3分子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠CD3分子试剂盒、小鼠CD3分子elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Benzoin 119-53-9 中文名:安息香 分子式:C14H12O2 度:98.0% 关键词:
弧菌通用PCR检测试剂盒说明书Hela-RFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin生物素基妥布霉素酰胺质量规格:美国进口Biotinyl Tobramycin Amide
转化生长因子beta超家族妥布霉素硫酸盐质量规格:美国进口Tobramycin sulphate
人肾小球内皮细胞 (HRGEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 Mouse氘化妥布霉素质量规格:美国进口Tobramycin Deuterated
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1盐酸拓扑替康标记 d6质量规格:美国进口Topotecan Hydrochloride Labeled d6
FGFR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 脱氧胆酸钠;去氧胆酸钠质量规格:>99%,BR deoxycholate
人胚肾细胞(亚系克隆);FIP293 人肾管状上皮细胞完全培养基 100mL碳酸胍shēng huà shì jì容量:500毫克
人细胞;5637(HTB-9)芦荟大皇速 cloq-qmodin 481-7-1
HA Others Influenza B 乙型 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 壬二醋 cZqLcIC cCID 13-99-9
MDA-MB-435S 人导管癌细胞山梨酸钾shēng huà shì jì容量:100克
A549人非小细胞细胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS(录霉素)
PCR检测试剂盒:
弧菌通用PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。