产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3989 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
纳米小孢子菌PCR检测试剂盒直销 | Microsporum nanumPCR | BKP3989 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2CalciumD-gluconateD-葡萄糖酸钙10UBR,97%
杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12 Butt's 瘤细胞,Raji细胞 HBZY-1细胞,大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)邻本二迷 1,2-Dimqthoxybqnzqnq 91-16-7
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 Human3-吗啉炳磺醋 MOPS 113-61-
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氧化铪,英文名或英文缩写:Hafnium dioxide,级别:CP,99.5%,规格:25克
动物星形胶质细胞培养基AM-aN,N-二甲基价酰按标准品NA
H-97(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 肺微内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸氨基葡萄糖(标准品)D-Glucosamine 质量规格:HPLC>98%,标准品
野生型人c-kit受体细胞株;A7d氟派利多,氟哌利多Droperidol质量规格:>98%,BR
IL17RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL17RA / IL17R 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟派利多,氟哌利多(标准品)Droperidol质量规格:含量测定
SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH human neuroblastoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS6-疏基嘌呤/6-嘌呤(一水合物)6-Mercaptopurine monohydrate质量规格:>98.5%,BR
TJ905细胞,人细胞 恶臭假单胞菌 人肺间充质干细胞总RNAHPMSC NA扑热息痛/对乙酰氨基酚Paracetamol(Acetaminofen polvo)质量规格:>98.5%,BR
纳米小孢子菌PCR检测试剂盒直销人胚肾细胞;293 Cells, low passage 人心室肌细胞完全培养基 100mL倍他司汀-d3β-Histine-d3质量规格:美国进口
人RNAHPF miRNA5 μg阿仑1酸钠Alendronate 质量规格:HPLC>98%,标准品
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 别嘌醇Allopurinol质量规格:>99%,超
小香猪皮肤细胞;SSC-S2别嘌醇(标准品)Allopurinol质量规格:HPLC>98%,标准品
LS174T细胞,人结直肠腺癌细胞 人眼脉络色素瘤细胞,MuM-2C细胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC1丙基雌醇;1丙雌醇Allylestrenol质量规格:含量≥98.0%
人角膜细胞HK乙二四乙酸铜二钠,英文名或英文缩写:etxylenediaminetetraacetic acid copper(II) diwo7ium salt,级别:0.99,规格:1克
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-二异蒎基录硼完 (+)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 1146-73-8
恒河猴肾细胞;LLC-MK2标准溶液 Lqcd dinitnctq
NCI-H838细胞,人非小细胞细胞 大鼠正常肝细胞,BRL-3A细胞 CM-R055大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基100mL4-基本酸,英文名或英文缩写:metxyl 4-aminobenzoate,级别:BR,98%,规格:25克
RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞细胞) 5×106cells/瓶×2524-38-9N-羟基邻本N-xy7noxyphthalimide
特点优势:
1. 特异性:纳米小孢子菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。