PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：溃蚀齿密螺旋体PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Atractylodin  中文名：苍术素  分子式：C13H10O    红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测定试剂盒（比色法）

Atorvastatin calcium  中文名：阿托伐他汀钙  分子式：C33H35FN2O5    铜－ATP酶（Cu-ATPase）测定试剂盒（比色法）                 

Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    总谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）测定试剂盒（微板法）

Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O    酸性0酸酶（ACP）测定试剂盒（微板法）

Aspartame  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5    抗酸性0酸酶（SACP）试剂盒（比色法）
豚鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 ，英文名： CRP ELISA Kit  2,4-Dihydroxypyridine  626-03-9  中文名：  分子式：C5H5NO2  度：98.0%  关键词： 

豚鼠Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)ELISA试剂盒 ，英文名： KL-6 ELISA Kit  2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名：2,4-双(α,α-二甲基苯甲基)苯酚  分子式：C24H26O  度：98.0%

豚鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit  2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6  度：98.0%  关键词： 

兔组织因子途径抑制物elisa试剂盒   兔组织因子途径抑制物试剂盒   规格型号：96T/48T   兔组织因子途径抑制物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔组织因子途径抑制物试剂盒、兔组织因子途径抑制物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Allopurinol  315-30-0  中文名：别嘌醇  分子式：C5H4N4O 

兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2  度：98.0%  关键词：
溃蚀齿密螺旋体PCR检测试剂盒说明书IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白奥氮平质量规格：>99%,USP,BR,可用于细胞培养Olanzapine

人神经细胞(HN) (10×106 ) 小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) MGC80-3(MGC-803)人细胞奥氮平（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Olanzapine

CM-R001大鼠肺微内皮细胞完全培养基100mL美伐他汀,康百汀质量规格：>97%,BR,可用于细胞培养Mevastatin

SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人细胞裂解液 (阳性对照) 美伐他汀(标准品)质量规格：>95%,标准品，用于含量测定Mevastatin

人微内皮细胞HCMEC6-氨基青霉烷酸质量规格：>98%,BR6-Aminopenicillanic acid
EB病毒转化的人B细胞;KMY0901 人真皮上皮细胞完全培养基 100mL富马酸氯马斯汀（标准品）质量规格：HPLC含量测定Clemastine fumarate

髓核细胞培养基NPCM富马酸氯马斯汀质量规格：>98%,BRClemastine fumarate

CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人细胞裂解液 (阳性对照) 富马酸酮替芬（标准品）质量规格：含量测定Ketotifen fumarate

GPH4 豚鼠心肌来源细胞己内酰胺（标准品）质量规格：供检查用2-Oxohexamethylenimine

CM-M014小鼠气管和上皮细胞完全培养基100mL百蕊草素I；山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷；阿福豆苷(标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Kaempferol-3-O-glucorhamnoside
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。