PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：刚地弓形虫PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Araliadiol  中文名：  分子式：C15H20O2    总基酸（T－AA）测试盒   The total amino acid (TAA) test kit

Antipyrine  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O    羟脯酸测试前处理试剂   Preeatme reage hydroxyproline test

Anthraquinone-2-carboxylic acid  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4       Hydroxyproline (Hyp) test kit

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二钠盐  分子式：C14H6Na2O8S2    羟脯酸（Hyp）测试盒   Glamine syhetase (GS) test kit              

Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2    总碱度测定试剂盒   Total alkalinity determination kit
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%

兔子孕激素elisa试剂盒   兔子孕激素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子孕激素试剂盒、兔子孕激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%  关键词： 

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4  度：98.0%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子孕激素/孕(PROG)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Adrenosterone  中文名：肾上腺甾酮  分子式：C19H24O3 

兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名：  分子式：C29H46O3
刚地弓形虫PCR检测试剂盒说明书IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸伐昔洛韦水合物质量规格：美国进口Valacyclovir hydrochloride hydrate

A-375 [A375], 人恶性素瘤细胞株17-酮基维库溴铵质量规格：美国进口17-Keto Vecuronium Bromide

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-去乙酰基维库溴铵质量规格：美国进口3-Desacetyl Vecuronium

大鼠脑平滑肌细胞完全培养基 100mL玉米素核苷同分质量规格：美国进口Zeatin riboside mixed Isomers

B95-8绒猴EBV转化的白细胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS盐酸多沙普仑质量规格：美国进口Doxapram hydrochloride
人胚胎肠粘膜组织来源细胞;CCC-HIE-2液体生物防腐剂，英文名或英文缩写：Proclin 300，级别：AR，99%，规格：25克

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 碳醋铋;减式碳醋铋;碳醋氧铋;碳醋铋 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4

非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸，英文名或英文缩写：Sulfamic acid，级别：BR，97%，规格：500克

CW-2细胞，人细胞 人色素瘤细胞,A875细胞 人急性早幼粒细胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制剂蛋白组学级25MG26305-03-3COLD

HCT-15(人细胞) 5×106cells/瓶×2(果胶酶Y-23)
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。