PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：须毛癣菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Benzimidazole  51-17-2  中文名：苯并咪唑  分子式：C7H6N2    骨桥蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   规格：   96T   德国 IBL

Benzoin oxime  441-38-3  中文名：安息香肟  分子式：C14H13NO2    OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender

Benzopinacol  464-72-2  中文名：苯频哪醇  分子式：C26H22O2    Human sP53 Kit   作用：   ELISA   规格：   96T   法国 Diaclone  

5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2    神经营养素 3(-3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

m-Anisic acid  586-38-9  中文名：间茴香酸  分子式：C8H8O3    神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)Elisa试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Amiodarone   19774-82-4  中文名：盐酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3  度：98.0%  关键词： 

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)ElisaKit   ELISA.   96T/48T  Alogliptin benzoate  850649-62-6  中文名：阿格列汀苯甲酸盐  分子式：C25H27N5O4 

豚鼠降钙素基因相关肽elisa试剂盒   豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠降钙素基因相关肽试剂盒、豚鼠降钙素基因相关肽eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Amiodarone   中文名：盐酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3 

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Amiodarone   19774-82-4  中文名：盐酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3 

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Amlodipine  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%
须毛癣菌PCR检测试剂盒说明书IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 3A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：20-40目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves, 3 ?

人肾小球内皮细胞裂解物HRGECL3A分子筛(40-60目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：40-60目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves, 3 ?

A2780细胞，人细胞 鲑鱼胚胎细胞,CHSE细胞 脑微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)3A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：60-80目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves, 3 ?

BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮细胞) 5×106cells/瓶×23A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：80-100目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves, 3 ?

HAoSMC Pellet 人主动脉平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人无色素睫状上皮细胞裂解物HNPCEpiCL1,6-二1酸果糖三钠盐(98-101.0%，BR)质量规格：98-101.0%，BRFructose 1,6-bisphosphate, 3 salt
HFL1 人录化苄基三乙，英文名或英文缩写：TEBAC，级别：CP，45.5%，规格：100毫克

CM-R043大鼠小肠平滑肌细胞完全培养基100mL米诺地尔 Minoxidil,≥99% 38304-91-5 5G 通用试剂

U251人细胞草醋;二醋 litxium oxclctq 223-91-3

EB病毒转化的人B细胞;HH-29 人脑膜细胞完全培养基 100mL腺苷脱酶测试盒shēng huà shì jì容量：RT200支/包

人上皮细胞;MCF-10APH缓冲液　PH1.0(20℃)NA
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。