PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：乡土旋毛虫PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Averantin  中文名：  分子式：C20H20O7    总蛋白定量测试盒（带标准；考马斯亮兰法）   Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)

Avanafil  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3    蛋白标准品（总蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)

Aurantio-obtusin  中文名：橙黄决明素  分子式：C17H14O7    微量游离血红蛋白测试盒   ace free hemoglobin test case              

Atrazine  中文名：阿特拉津  分子式：C8H14ClN5    总谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）测定试剂盒（微板法）

Atracurium oxalate  中文名：阿曲库胺草酸盐  分子式：C53H68N2O16    酸性0酸酶（ACP）测定试剂盒（微板法）
豚鼠白介素12elisa试剂盒   豚鼠白介素12试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠白介素12试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠白介素12试剂盒、豚鼠白介素12eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Allitol  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6 

豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒 ，英文名： IL12B ELISA Kit  2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  中文名：2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式：C13H9Cl2NO  度：99.0%

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit  2-Allylphenol  1745-81-9  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O  度：98.0%  关键词： 

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Allylestrenol  中文名：烯丙雌醇  分子式：C21H32O 

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T              Alogliptin  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2
乡土旋毛虫PCR检测试剂盒说明书IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 标签)罗通定/左旋延胡索乙素/左旋四氢巴马汀质量规格：≥97%,BRRotundine/ L-Tetrahydropalmatine

WERI-Rb-1(人视网膜神经细胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形细胞株利拉萘酯质量规格：>99%,ARLiranaftate

CM-R081大鼠内皮细胞完全培养基100mL甲基反亚油酸甲酯(分析标准品)质量规格：分析标准品Methyl linolelaidate

OLR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 OLR1 / LOX1 人细胞裂解液 (阳性对照) 肉豆蔻酸甲酯(分析标准品,≥99.5%(GC))质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)Methyl myristate

小鼠背脊髓神经元MN-dsc棕榈酸甲酯(分析标准品,≥99.0%(GC))质量规格：分析标准品,≥99.0%(GC)Methyl palmitate
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人细胞裂解液 (阳性对照) 硼替佐米中间体I质量规格：>97%Bortezomib intermediates I

稳定表达EBNA1的人胚肾细胞;293E保特佐米蒎烷二醇酯质量规格：>97%BortezoMib Pinanediol Ester

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺司特质量规格：>98%,BRSuplatast tosilate

人肾管状上皮细胞完全培养基 100mL1丙基-α-D-吡喃半乳糖苷质量规格：>97%,BRAllyl α-D-galactopyranoside

B16F1细胞，小鼠色素瘤细胞 MRC-5(胚肺细胞) Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33醋酸布舍瑞林质量规格：>98%,BRBuserelin Acetate
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。