PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：环纹背带线虫PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Ampicillin Trihydrate  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S    总铁结合力（TIBC）测试盒   Total iron binding (TIBC) test case

Amoxicillin trihydrate  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S    髓过氧化物酶（MPO）测试盒   Myeloperoxidase (MPO) test kit

Amoxicillin  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S    溶菌酶（LZM）测试盒（带标准）   Lysozyme (LZM) test case (with standard)

Amoxapine  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O    溶菌酶标准品   Standard for lysozyme              

Amorolfine   中文名：盐酸阿莫洛芬  分子式：C21H36ClNO    总铁快速测试盒   Total iron rapid test case
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9-Dehydroandrostenedione  中文名：9-去氢雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  中文名：17-亚乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮  分子式：C21H28O3  度：95.0%

兔子神经生长因子elisa试剂盒   兔子神经生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子神经生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子神经生长因子试剂盒、兔子神经生长因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Benzoyl-L-histidine  中文名：苯甲酰基-L-组氨酸  分子式：C13H13N3O3 

兔子神经生长因子(NGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              9-Dehydroandrostenedione  中文名：9-去氢雄烯二酮  分子式：C19H24O2 

兔子神经生长因子(NGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  17-Acetyloxy-6-chloro-1α-chloromethylpregna-4,6-diene-3,20-dione  17183-98-1  中文名：醋酸环丙氯地孕酮  分子式：C24H30Cl2O4  度：98.0%  关键词：
环纹背带线虫PCR检测试剂盒直销INHBB Protein Human 重组人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 标签)雷洛昔芬6,4'-二-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Raloxifene 6,4'-Bis-β-D-glucuronide

人颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠肾细胞 RattusN10-单一去甲基利扎曲坦质量规格：美国进口N10-Monodesmethyl Rizatriptan

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5利扎曲坦N10-氧化物质量规格：美国进口Rizatriptan N10-Oxide

人小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 )17-去乙酰罗库溴铵质量规格：美国进口17-Desacetyl Rocuronium

Ⅱ型肺泡上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)雷公藤内酯甲（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Wilforlide A
人肝窦内皮细胞RNAHHSEC miRNA5 μg植物血球凝集素PHA-P，英文名或英文缩写：PHA-P，级别：BR,10u/mg，甘薯，液体，规格：25克

TNFSF15 Others Rat 大鼠 TNFSF15 / TL1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 1，1，3，3-四氧基炳烷 1,1,3,3-Tqtrcmqthoxypropcnq 2010/2/3

人微内皮细胞完全培养基 100mL麦芽三塘水合物 95% McLTOTRIOSq HYDRcTq 95 31693-63-3

MLTC-1细胞，小鼠间质细胞瘤细胞 KG-1(细胞) 人恶性色素瘤细胞;A-375 [A375]AZUREA,CHLORIDESALT天青A*25G531-53-3RT

CX3CL1 Protein Human 重组人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 标签)2935-35-5L-(+)-本甘酸L-pxenylglycine
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。