PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：塞皮克病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

5α-Androstanedione  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2    锰过氧化物酶（MnP）测试盒   可见分光光度法   50管/24样

5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2    双缩脲法蛋白含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样

5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4    双缩脲法蛋白含量测试盒   可见分光光度法   100管/96样           

5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C37H35N3O7    胰岛素样生长因子结合蛋白5   英文名称：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGFBP5

5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羟甲基糠醛  分子式：C6H6O3    胰岛素   英文名称：   Human Insulin   规格：   48T/96T   英文缩写：   INS
兔固（ALD）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  关键词：  红根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体elisa试剂盒   兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒、兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  关键词：  千里光; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  关键词： 

兔骨碱性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2
塞皮克病毒PCR检测试剂盒供应NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO细胞裂解液 (阳性对照) 肌苷(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Inosine

角膜上皮细胞培养基CEpiCM-prf5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na)质量规格：>98%,BR5'-AMP-Na2

婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-4 原髓细胞，HL-60细胞 Dami(巨核细胞细胞)灭菌唑(分析标准品,99.2%)质量规格：分析标准品,99.2% Triticonazole

EB病毒转化的人B细胞;KMY0901速灭威标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Tsumacide solution

BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人细胞裂解液 (阳性对照) 嗪氨灵(标准品)质量规格：分析标准品Triforin
人平滑肌细胞完全培养基 100mL地布卡因质量规格：美国进口Dibucaine

MuM-2C细胞， 人眼脉络色素瘤细胞 赭绿青霉 小鼠成纤维细胞;φ2盐酸地布卡因-d9质量规格：美国进口Dibucaine-d9 Hydrochloride

ANGPT2 Protein Human 重组人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 标签)多利培南质量规格：美国进口Doripenem

LLC(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 多沙普仑质量规格：美国进口Doxapram

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)奥沙拉秦钠质量规格：>98%,BROlsalazine di
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。