PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：马红球菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S  度：98.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  145783-15-9  中文名：  分子式：C7H9Cl2N3S  度：98.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  188742-80-5  中文名：4,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯  分子式：C26H26O12  度：97.5%  关键词：  抗氧化; 莽草酸; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  35202-54-1  中文名：  分子式：C11H11NO2  度：98.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α   英文名称：   Macrophage Inflammatory protein 1α   规格：   48T/96T   英文缩写：   MIP-1α/CCL3

4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine   28783-41-7  中文名：  分子式：C7H10ClNS  度：98.0%  关键词：    小鼠N-甲基-D-天门冬酸受体亚单位1型   英文名称：   Mouse N-methyl-D-aspaate receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   NMDA-R1
人转移因子(TF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2  度：%

人转移因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3-(Boc-Amino)piperidine  309956-78-3  中文名：  分子式：C10H20N2O2  度：98.0%   

人转移生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2 

人转铁蛋白受体elisa试剂盒   人转铁蛋白受体试剂盒   规格型号：96T/48T   人转铁蛋白受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人转铁蛋白受体试剂盒、人转铁蛋白受体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名：  分子式：C6H10O2 

人转铁蛋白受体2(TFR2)酶联吸附测定试剂盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名：  分子式：C26H31N3O8  度：98.0%  关键词：
马红球菌PCR检测试剂盒供应RCC-krause细胞，细胞 人细胞,CaSKi细胞 人内根壳细胞总RNAHHIRSC NA幼枝含断氧化马钱子甙(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Secoxyloganin

非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-醋酸钠（标准品）质量规格：HPLC法含量测定 Acetate

FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) 葡萄糖酸钠（标准品）质量规格：HPLC法含量测定 gluconate

小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3盐酸索他洛尔（标准品）质量规格：含量测定Sotalol hydrochloride

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 地奈德标记13C3质量规格：美国进口Desonide - Labeled 13C3
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 固盐shēng huà shì jì容量：2～8°C50毫克

人T细胞细胞;HuT 78姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP

人卵巢成纤维细胞(HOF) ( 5×105 )苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用试剂

CM-R048大鼠肠巨噬细胞完全培养基100mL二炎酸盐shēng huà shì jì容量：100克

小鼠色素瘤细胞;B16 小鼠肝实质细胞完全培养基 100mLD-Fructose 250g/500g/1kg/5kg原装 Amresco 0226
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。