PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：四角瑞氏PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3  度：97.0%  关键词：  灵芝; 麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库  小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%  关键词：  灵芝; 麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库  小鼠解偶联蛋白1(UCP1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid  196404-55-4  中文名：  分子式：C22H25NO6  度：98.0%  关键词：    小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

3-Quinuclidinone  3731-38-2  中文名：3-奎宁环酮  分子式：C7H11NO  度：98.0%  关键词：    小鼠解脲脲原体抗体elisa试剂盒   小鼠解脲脲原体抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠解脲脲原体抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠解脲脲原体抗体试剂盒、小鼠解脲脲原体抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  103335-55-3  中文名：  分子式：C19H29NO3  度：98.0%  关键词：    小鼠角化细胞因子elisa试剂盒   小鼠角化细胞因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠角化细胞因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠角化细胞因子试剂盒、小鼠角化细胞因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
人脂肪酶(Lipase)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  中文名：  分子式：C11H7NO4 

人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4  度：%  关键词： 

人脂多糖结合蛋白elisa试剂盒   人脂多糖结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂多糖结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂多糖结合蛋白试剂盒、人脂多糖结合蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名：  分子式：C10H10O2 

人脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒   Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit                 2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S 

人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4
四角瑞氏PCR检测试剂盒价格RSPO1 Others Mouse 小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸铵铝十二水(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAluminum ammonium sulfate, dodecahydrate

人虹膜色素上皮细胞裂解物HIPEpiCLAMP缓冲液(>98%,BR)质量规格：>98%,BRAMP buffer concentrate

小耳猪肺细胞;SEP-L2 大细胞细胞，NCI-H661细胞 DSL-6A/C1细胞，大鼠细胞株苯并咪唑(>98%,BR)质量规格：>98%,BRBenzimidazole

人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100]羧肽酶 B >170 U/mg质量规格：BCCarboxypeptidase B

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟1酸酯(DFIH) 质量规格：>98%,BR2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate
人表皮角质形成细胞完全培养基 100mL0.5ml离心管盒shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25KU

ZA6细胞，转S9基因仓鼠卵巢细胞 WI-38(人二倍体胚肺细胞) 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K11酸1醇酸单环... Phospho(enol)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用试剂

EFNA2 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 标签)言醋吉西他滨 GqMcitcbinq xy7nochloridq 1111-03-9

BC-009(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾足细胞;Mouse podocyteCHLORTETRACYCLINExy7noCHLORIDE盐酸金霉素美国药典级黄色结晶粉末COLDsigma

人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH111-40-0二三胺Dietxylenetriamine
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。