PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：有轮瑞氏PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H29NO3    鸭白介素6(IL-6)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

3-O-Methyl-Estrone  中文名：3-氧甲基基雌酮  分子式：C19H24O2    鸭白介素4(IL-4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  中文名：3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H36O3    鸭白介素1(IL-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

3-O-Benzyl estrone  中文名：3-O-苄基雌酚酮  分子式：C25H28O2    鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

3-O-Acetylandrostenone hydrazone  中文名：3-O-乙酰基雄酮腙  分子式：C21H32N2O2    鸭α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  2-Benzoylbenzoic acid  85-52-9  中文名：2-苯甲酰苯甲酸  分子式：C14H10O3 

人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3  度：98.0%  关键词： 

人脂蛋白aelisa试剂盒   人脂蛋白a试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋白a试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋白a试剂盒、人脂蛋白a elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Benzothiazolol  934-34-9  中文名：2-羟基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS  度：98.0%  关键词： 

人脂蛋白a（Lp-a）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3  度：98.0%

人脂阿拉伯甘露聚糖elisa试剂盒   人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒、人脂阿拉伯甘露聚糖elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Benzothiazolol  934-34-9  中文名：2-羟基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS
有轮瑞氏PCR检测试剂盒直销S100B Others Human 人 S100B 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸小檗碱(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Berberine hydrochloride

CL-00074T1(小鼠癌细胞)5×106cells/瓶×2京尼平苷酸质量规格：HPLC≥98%Geniposidic acid

EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 人细胞裂解液 (阳性对照) 京尼平苷酸(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Geniposidic acid

小鼠细胞完全培养基 100mL原儿茶酸(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品3,4-Dihydroxybenzoic acid

TM3小鼠间质细胞 TM3 mouse Leydig cells D-MEM/F-12培养基(GIBCO)+5%马血清+2.5%FBS盐酸戊乙奎（标准品）质量规格：含量测定Penehyclidine Hydrochloride
人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]组蛋白H1(小牛胸腺)5克

PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2

小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记)尿苷二嶙酸葡萄糖5克

3T6细胞，小鼠胚胎成纤维细胞 人细胞,gpc-1细胞 人视网膜色素上皮细胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg肾上腺酮1克RT

恒河猴肾细胞;RM-316373-93-62-脱氧腺苷一水合物 ≥99%2'-Deoxyadenosine monohydrate
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。