PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：同猪病毒1型伪病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%      小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  99469-99-5  中文名：  分子式：C13H16O5  度：98.0%  关键词：    小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid  162401-62-9  中文名：  分子式：C12H12F2O4  度：98.0%  关键词：    小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  443882-99-3  中文名：  分子式：C13H9ClFNO3  度：98.0%  关键词：    小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  928165-59-7  中文名：  分子式：C17H25ClO  度：98.0%  关键词：    小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人纤维蛋白(FBL)酶联吸附测定试剂盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit  3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名：异绿原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%

人纤溶抑制因子(TAFI)酶联吸附测定试剂盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit  3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-双(羟甲基)杜烯  分子式：C12H18O2 

人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒、人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one  1521197-43-2  中文名：  分子式：C16H15ClN4O 

人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS 

人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%
同猪病毒1型伪病毒PCR检测试剂盒说明书SF767细胞，人细胞 阴沟肠杆菌 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Methimazole Thio-β-D-glucuronide

RKO-E6(人转基因细胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林质量规格：美国进口Mezlocillin

GBC-SD(人细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞))5×106cells/瓶×2 盘羊皮肤细胞;ASHS3二去甲基米非司酮质量规格：美国进口Didemethyl Mifepristone

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-122-羟基米非司酮质量规格：美国进口22-Hydroxy Mifepristone

16. 细胞系统甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物质量规格：美国进口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌细胞生长培养基2型(即用型) 500ml2,4-滴，英文名或英文缩写：2,4-D，级别：高，99%，规格：25克

人肺动脉内皮细胞RNAHPASMC miRNA5 μg贝那普利相关物质A Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound c;(3R)-3-[[(1R)-1-(qthoxyccrbonyl)-3-phqnylpropyl]cMino]-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq-1-ccqtic ccid, Monoxy7nochloridq 12447-89-2

MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 水溶性壳聚糖，英文名或英文缩写：Chitosan，级别：高 ，98%，规格：25毫克

猪细胞;ST1-甲基-1H-咪唑，英文名或英文缩写：1-metxylimidazole，级别：BR，99%，规格：1公斤

U251细胞，细胞 鼠成纤维细胞系,NIH/3T3细胞 人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原装 INALCO1758-0070
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。