PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：普通变形杆菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO  度：98.0%      小鼠碱性0酸酶   英文名称：   Mouse Alkaline phosphatase   规格：   48T/96T   英文缩写：   ALP

3-Amino-2-naphthoic acid  5959-52-4  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%      小鼠同种异体移植炎性因子1   英文名称：   Mouse Allograft Inflamuatory Factor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   AIF-1

3-Amino-2,6-piperidinedione   24666-56-6  中文名：  分子式：C5H9ClN2O2  度：98.0%  关键词：    小鼠生成素样蛋白2   英文名称：   Mouse Angiopoietin like protein 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   ANGPTL2

3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one  4149/6/8  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O  度：98.0%      小鼠生成素样蛋白4   英文名称：   Mouse Angiopoietin Like Protein 4   规格：   48T/96T   英文缩写：   ANGPTL4

3-Allylrhodanine  1457-47-2  中文名：3-烯丙基罗丹宁  分子式：C6H7NOS2  度：99.0%  关键词：    小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
人复合特异性抗原(CPSA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  中文名：  分子式：C17H23NO5 

人多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联吸附测定试剂盒   Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit  2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6  度：98.0%

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Timosaponin B-II  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19 

人抵抗素(Resistin)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T  3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名：  分子式：C20H24O3 

人单病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol  899822-99-2  中文名：  分子式：C19H31NO5
普通变形杆菌PCR检测试剂盒价格SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸伐昔洛韦/盐酸万乃洛韦（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Valacyclovir HCl

人表皮色素细胞-浅色素总RNAHEM-l NA维库溴铵质量规格：>99%,BRVecuronium Bromide

RT4细胞，细胞 人胚肺细胞,MRC-5细胞 原代平滑肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml维库溴铵（标准品）质量规格：>99%,标准品Vecuronium Bromide

豹猫肺成纤维样细胞;LCL4GDPNa2;5’-二1酸鸟苷二钠质量规格：>90%,BRGDP Di Salt

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) SU11274质量规格：>98%,选择性的Met抑制剂SU-11274
SGC-7901 人细胞R-联萘酚1酸酯质量规格：>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate

CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠细胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤质量规格：>97%,原装进口2,6-Dichloropurine

mCF, 小鼠成纤维细胞2,4-二氯喹唑啉质量规格：>98%2,4-Dichloroquinazoline

人胚肾上皮细胞系;KiMA 人直肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL9-氯甲基蒽质量规格：>98%，进口原装9-(Chloromethyl)anthracene

人纤维细胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)1-Bromoanthracene
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。