产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4326 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
圣米吉尔海狮病毒PCR检测试剂盒说明书 | San Miguel sea lion virus (SMSV)RTPCR | BKP4326 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
5-Aminofluorescein 中文名:5-氨基荧光素 分子式:C20H13NO5 度:98.0% 小鼠神经丝蛋白(NF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0% 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N-Acetyl-L-tyrosine 中文名:乙酰酪氨酸 分子式:C11H13NO4 度:98.0% 小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Allopurinol 中文名:别嘌醇 分子式:C5H4N4O 度:98.0% 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0% 小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
突触核蛋白 英文名称: Human α Synucleinα 规格: 48T/96T 英文缩写: α-SYN 4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 52298-44-9 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0% 关键词:
头孢苄 1g Amprolium 中文名:盐酸氨丙林 分子式:C14H20Cl2N4 度:98.0%
铜兰蛋白(CP)检测 Glamate detection β-Anhydrouzarigenin 3080-20-4 中文名: 分子式:C23H32O3
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测定试剂盒(比色法) Repaglinide ethyl ester 147770-06-7 中文名: 分子式:C29H40N2O4
铜(Cu)测定试剂盒(络合比色法) Xanthopurpurin 518-83-2 中文名:1,3-二羟基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:97.0% 关键词:
圣米吉尔海狮病毒PCR检测试剂盒说明书P815小鼠肥大细胞瘤细胞 P815 mouse mastocytoma cell DMEM培养基+10%FBS异丁司特(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Ibudilast
白细胞介素-10超家族吉西他滨质量规格:>98%,free baseGemcitabine
SF767(人细胞) 5×106cells/瓶×2 SHG44(细胞)沙利度胺(反应停)质量规格:>98%Thalidomide
CL-0052Caki-1(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2沙利度胺(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Thalidomide
TNFRSF18 Others Human 人 GI / TNFRSF18 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酰紫堇灵(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Acetylcorynoline
MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse藜芦醛shēng huà shì jì容量:100克
T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人细胞裂解液 (阳性对照) 三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
人脐平滑肌细胞cDNAHUVSMC cDNA西蒙氏柠檬酸盐培养基shēng huà shì jì容量:2~8℃50毫升
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基-β-环糊精shēng huà shì jì容量:100克
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化)135-55-72-羟基-7-磺酸钠wo7ium 2-naphthol-7-sulfonate
特点优势:
1. 特异性:圣米吉尔海狮病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。