技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：普雷沃菌属通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
3,6'-Disinapoylsucrose  139891-98-8  中文名：3,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19  度：98.0%  关键词：  ; 远志; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠甲状腺球蛋白elisa试剂盒   小鼠甲状腺球蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠甲状腺球蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠甲状腺球蛋白试剂盒、小鼠甲状腺球蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-双(羟甲基)杜烯  分子式：C12H18O2  度：98.0%      小鼠甲状腺过氧化物酶elisa试剂盒   小鼠甲状腺过氧化物酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠甲状腺过氧化物酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠甲状腺过氧化物酶试剂盒、小鼠甲状腺过氧化物酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  2450-53-5  中文名：异绿原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%  关键词：  *; 抗毒; 莽草酸; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene  24352-51-0  中文名：  分子式：C28H42  度：%  关键词：  麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库  小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脱水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  关键词：    小鼠舒缓激肽(BK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人 Apelin(Apelin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Ampicillin Trihydrate  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%

热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-Hydroxycatalponol  中文名：  分子式：C15H18O3  度：97.0%

热休克蛋白70   英文名称：   Heat shock protein 70   规格：   48T/96T   英文缩写：   HSP70  Palmitone  502-73-8  中文名：棕榈酮  分子式：C31H62O  度：98.0%  关键词： 

热休克蛋白27   英文名称：   Heat shock protein 27   规格：   48T/96T   英文缩写：   HSP27  Palmitone  中文名：棕榈酮  分子式：C31H62O 

热休克蛋白 70(HSP70)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Panaxydiol  63910-76-9  中文名：  分子式：C17H24O2  度：%  关键词：
普雷沃菌属通用PCR检测试剂盒直销SV40T转化人脐内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1果胶(半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %)质量规格：半乳糖醛酸(干基计)≥74.0 %Pectin

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯(AR,99%)质量规格：AR,99%Tributyl phosphate

CL-0184PANC-1(人细胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)质量规格：CPTributyl phosphate

TNK2 Others Human 人 ACK1 / TNK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯(标准品)质量规格：分析标准品Tributyl phosphate

人上皮细胞裂解物HMEpiCL3,5-二水杨酸锂(>98%，BC)质量规格：>98%，BCLithium 3,5-diiodosalicylate
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人细胞裂解液 (阳性对照) N-苄氧羰基-D-色酸，英文名或英文缩写：CBZ-D-Trp，级别：特，98%，规格：10克

人神经元RNAHN miRNA5 μg均本四加腊酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7

FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 米力农相关物质A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1

人内皮细胞完全培养基 100mL四乙酸二基二钠盐，英文名或英文缩写：EDTA-2Na，级别：BR，99%，规格：1克

3T3NIH细胞，小鼠成纤维细胞 HUVEC(人脐内皮细胞) 小鼠细胞;GT1-1GDX　502(聚二本多孔小球)NA