产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4210 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
猪肠病毒PCR检测试剂盒说明书 | Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR | BKP4210 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 中文名:2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯 分子式:C26H21NO3 干细胞因子受体 (SCF R) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS 血清淀粉样蛋白 英文名称: serum amyloid A protein 规格: 48T/96T 英文缩写: SAA
2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Salusin-α 英文名称: Salusin-α 规格: 48T/96T 英文缩写: Salusin-α
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 干细胞因子 英文名称: stem cell factor 规格: 48T/96T 英文缩写: SCF
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 干细胞因子受体 英文名称: stem cell factor receptor 规格: 48T/96T 英文缩写: SCF R
焦碳酸二乙脂 10ml Amorolfine 中文名:盐酸阿莫洛芬 分子式:C21H36ClNO 度:98.0%
胶质纤维酸性蛋白 英文名称: glial fibrillary acidic protein 规格: 48T/96T 英文缩写: GFAP 3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 899822-97-0 中文名: 分子式:C17H25NO3
胶质细胞源神经营养因子 英文名称: glial cell line-derived neuoophic factor 规格: 48T/96T 英文缩写: GDNF L-Dihydroorotic acid 中文名:L-4,5-二氢乳清酸 分子式:C5H6N2O4
碱性酯酶染液 Wright'dye 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 中文名:4,4'-环亚己基双苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
碱性木聚糖酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样 Testosterone enanthate 315-37-7 中文名:庚酸睾酮 分子式:C26H40O3 度:98.0% 关键词:
猪肠病毒PCR检测试剂盒说明书TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人细胞裂解液 (阳性对照) 二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Diethylene Glycol Diacetate
原代内皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Triethylene Glycol Diacetate
HT1080细胞,纤维细胞 细胞,HCE1细胞 人表皮色素细胞-中色素总RNAHEM-m NAO-乙酰基蓖麻酸甲酯(>80.0%(GC))质量规格:>80.0%(GC)Methyl O-Acetylricinoleate
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+柠檬酸三乙酯(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)Triethyl
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) 二去甲基佐米曲坦质量规格:美国进口Didesmethyl Zolmitriptan
Bel-7405细胞,人细胞 逆转录病毒包装用的人胚胎成纤维细胞,PA317细胞 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21改良番茄汁培养基shēng huà shì jì容量:500毫升
L6(大鼠成肌细胞) 5×106cells/瓶×2姆沙伯 G AW ChroMosorb G cW;
Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Differe. Medium, 间充质干细胞成骨分化培养基(即用型) 100ml聚乙二醇 1000 Poly(ethylene glycol) 1,000 (PEG 1000) 25322-68-3 100G 通用试剂
人表皮色素细胞-浅色素RNAHEM-l miRNA5 μg靛蓝胭脂红shēng huà shì jì容量:5克
VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人细胞裂解液 (阳性对照) D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原装 Fluka 48280
特点优势:
1. 特异性:猪肠病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。