PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：病毒2型PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone  18465-71-9  中文名：  分子式：C5H8O4    Human fibroblast surface aigen (FSP) ELISA Kit 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒

Tetrahydrolachnophyllum lactone  56407-87-5  中文名：  分子式：C10H14O2    HumanCompleme4,C4ELISAKit 人补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(Z)-Lachnophyllum lactone  81122-95-4  中文名：  分子式：C10H10O2    HumanDesmopressin/1-desamino-8-D-argininevasopressin,dDAVPELISA试剂盒人去氨加压素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素(dDAVP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Araliadiol  1354638-93-9  中文名：  分子式：C15H20O2    组织MEK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Annonacin  111035-65-5  中文名：  分子式：C35H64O7    HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
骨碱性0酸酶   英文名称：   bone alkaline phosphatase   规格：   48T/96T   英文缩写：   BALP  Otophylloside B  106758-54-7  中文名：青阳参苷B  分子式：C49H78O16  度：97.0%  关键词：  抗; 青阳参; 孕甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

骨钙素   英文名称：   Osteocalcin   规格：   48T/96T   英文缩写：   OC  Qingyangshengenin 3-O-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside  中文名：  分子式：C41H58O14 

骨成型蛋白-4   英文名称：   Bone morphogenetic protein-4   规格：   48T/96T   英文缩写：   BMP-4  Anthraquinone-2-carboxylic acid  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4 

骨成型蛋白-2   英文名称：   Bone morphogenetic protein-2   规格：   48T/96T   英文缩写：   BMP-2  Anthraquinone-2-carboxylic acid  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4  度：98.0%

谷酰胺测试盒   Glamine test kit  3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol  116539-55-0  中文名：  分子式：C8H13NOS
病毒2型PCR检测试剂盒价格VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 大孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography质量规格：300-400目,层析用

rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓硅酸(>98%,BC)Silicic acid hydrate质量规格：>98%,BC

rCSC, 大鼠心肌细胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]细胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮细胞)一氧化硅(>99%,BR)Silicon monoxide质量规格：>99%,BR

人T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77钨硅酸(>98%,BR)Silicotungstic acid hydrate质量规格：>98%,BR

SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸银(>99%,BR)Silver acetate质量规格：>99%,BR
人食道平滑肌细胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠纹状体神经元 Rattus盐酸脱氧土霉素，英文名或英文缩写：Doxycycline HCl，级别：15000～150000,液体,7条带，规格：100毫克

牛肾细胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基环(顺反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9

PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人细胞裂解液 (阳性对照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白组学级白色结晶RTsigma

CL-0173NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟，英文名或英文缩写：Ara-A，级别：超，98%，规格：1克

HepG2细胞， 人T瘤细胞系,Hut-102细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氢化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。