产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4174 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
派琴虫通用PCR检测试剂盒说明书 | PerkinsusPCR | BKP4174 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2-Amino-4-methylbenzothiazole 1477-42-5 中文名:2-氨基-4-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S Bite 1kg
2-Amino-6-methylbenzothiazole 2536-91-6 中文名:2-氨基-6-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 四硼酸 5kg
5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 119-79-9 中文名:5-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S Borate,Decahydrate 500g
2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS 肽酶抑制因子3 英文名称: Human Peptidase Inhibitor 3 规格: 48T/96T 英文缩写: PI-3
12-Aminolauric acid 693-57-2 中文名:12-氨基十二酸 分子式:C12H25NO2 过氧化物酶体增殖物活化受体γ 英文名称: Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 规格: 48T/96T 英文缩写: PPARγ
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISAKit ELISA. 96T/48T Hypocrellin A 中文名:竹红菌甲素 分子式:C30H26O10
大鼠过敏/补体片断4a(C4a)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4
大鼠过敏/补体片断4a(C4a)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tokinolide B 112966-16-2 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0% 关键词:
大鼠固(ALD)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tolazoline 中文名:盐酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2
大鼠二氧化酶elisa试剂盒 大鼠二氧化酶试剂盒 规格型号:96T/48T 大鼠二氧化酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:大鼠二氧化酶试剂盒、大鼠二氧化酶elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Lonidamine 中文名:氯尼达明 分子式:C15H10Cl2N2O2
派琴虫通用PCR检测试剂盒说明书大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-6 羊膜细胞,WISH细胞 786-O [786-0](肾透明细胞腺癌细胞)琼脂糖(美仑电泳级)质量规格:美仑,电泳级Agarose
EB病毒转化的人B细胞;KMY0903琼脂糖(Sigma)质量规格:Sigma原装Agarose
SPINK4 Others Human 人 SPINK4 人细胞裂解液 (阳性对照) 普拉洛芬质量规格:>97%,BRPranoprofen
CM-M064小鼠上皮细胞完全培养基100mL普拉洛芬(标准品)质量规格:HPLC>97%,标准品Pranoprofen
SPARCL1 Others Mouse 小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 人细胞裂解液 (阳性对照) 牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白组分五质量规格:Purity>98%,分子生物学级Albumin(bovine fraction V);BSA
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞) 5×106cells/瓶×2(1S,4R)盐酸舍曲林质量规格:美国进口(1S,4R) Sertraline Hydrochloride
HCAEC-c 人内皮细胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)氨基他达那非质量规格:美国进口Amino Tadalafil
视网膜muller细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)盐酸特拉唑嗪质量规格:美国进口Terazosin hydrochloride
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-苄基咪唑啉质量规格:美国进口2-Benzylimidazoline
杂交瘤(B类);C3110D2B2氨基阿苯达唑砜质量规格:美国进口Aminoalbendazole Sulfone
特点优势:
1. 特异性:派琴虫通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。