PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：猪圆环病毒2型PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

2-Flurbiprofen  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2    血0浓度测试盒   可见分光光度法   50管/48样

2-Fluoroadenosine  中文名：  分子式：C10H12FN5O4    血浓度测试盒   可见分光光度法   50管/48样

2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6    血清总铁结合能力测试盒   可见分光光度法   50管/48样           

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO    血浆游离基因组DNA提取试剂盒   Plasma free genomic DNA Exaction Kit

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde  中文名：  分子式：C19H14FNO    M13噬菌体单链基因组DNA快速提取试剂盒   Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA
环0酸腺苷   英文名称：   cyclic adenosine monophosphate   规格：   48T/96T   英文缩写：   cAMP  Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7 

环0酸鸟苷   英文名称：   cyclic adenosine monophosphate   规格：   48T/96T   英文缩写：   cGMP  vibo-Quercitol  488-76-6  中文名：  分子式：C6H12O5 

坏死因子相关凋亡诱导配体受体1   英文名称：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   AIL R1  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5 

坏死因子相关凋亡诱导配体受体 3(AIL R3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Arbidol   中文名：盐酸阿比朵尔  分子式：C22H26BrClN2O3S 

坏死因子相关凋亡诱导配体受体 1(AIL R1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Arbidol   中文名：盐酸阿比朵尔  分子式：C22H26BrClN2O3S  度：98.0%
猪圆环病毒2型PCR检测试剂盒说明书TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 己二酸二异癸酯质量规格：Diisodecyl Adipate

小鼠皮质神经元MN-c壬二酸双(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))质量规格：>75.0%(GC)Bis(2-ethylhexyl) Azelate

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人细胞裂解液 (阳性对照) 己二酸二异丙酯(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)Diisopropyl Adipate

大鼠胰腺上皮细胞完全培养基 100mL己二酸二丁酯(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)Dibutyl Adipate

BALL-1人B细胞急性细胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(内含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清吉非罗齐1-O-β-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide
PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Anilinexy7nochloride阿尼林盐0.25毫升CP

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4本加醋苄酯 Bqnzyl Bqnzoctq;Bqnzyl bqnzqnq ccrboxylctq;Bqnzyl phqnyl forMctq 10-21-4

T-47D细胞，管癌细胞 人细胞,EC871214细胞 大鼠细胞;UMR-106葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-50 Coarse 9048-71-9 100G 分离试剂

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B11,4-二乙磺酸倍半钠盐，英文名或英文缩写：PIPES sesquiwo7ium salt，级别：AR，规格：100克

CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照) MaltExtractAgar 500g原装 BD 211220/Oxoid
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。