PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：鸡PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS  度：98.0%      小鼠肌肝elisa试剂盒   小鼠肌肝试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠肌肝试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠肌肝试剂盒、小鼠肌肝eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

2-Aminonicotinic acid  5345-47-1  中文名：2-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%      小鼠肌钙蛋白elisa试剂盒   小鼠肌钙蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠肌钙蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠肌钙蛋白试剂盒、小鼠肌钙蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  302964-24-5  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS  度：98.0%  关键词：    小鼠活化蛋白elisa试剂盒   小鼠活化蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠活化蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠活化蛋白试剂盒、小鼠活化蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。   

2-Aminoisonicotinic acid  13362-28-2  中文名：2-氨基异烟酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%      小鼠肌肝（Cr）ELISA试剂盒         组装/原装

2-Aminofluorene  153-78-6  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N  度：99.0%  关键词：    小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
多酚氧化酶(PPO）测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO  度：98.0%  关键词： 

多巴胺   英文名称：   Human Dopamine   规格：   48T/96T   英文缩写：   DPN  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  中文名：  分子式：C28H46O2  度：%

动植物组织葡萄糖含量试剂盒   酶标法    50管/48样  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one   中文名：  分子式：C14H18ClN3O4  度：98.0%

动植物组织葡萄糖含量试剂盒   可见分光光度法    50管/48样              4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one   中文名：  分子式：C14H18ClN3O4 

动物组织基因组提取试剂盒   Animal tissue genomic Exaction Kit  Periplocoside F  119902-17-9  中文名：  分子式：C63H104O23  度：98.0%  关键词：
鸡PCR检测试剂盒价格WM451, 人色素瘤细胞 导管瘤细胞,BT474细胞 VERO(非洲绿猴肾细胞)乳酸测试盒(测全血)shēng huà shì jì容量：RT50支/包

小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6十六烷基基化铵 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用试剂

LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 半乳糖二醋异美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1

615小鼠树突状细胞瘤株;DCS氘代二甲亚砜shēng huà shì jì容量：500克

CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 121-54-0海胺1622HyaMine 1622;Quatrachlor;PheMerol chloride;PheMeride;PheMithyn;BenzethoniuM chloride Monohydrate;Benzyldimetxyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tetrametxylbutylpxenoxy)ethoxy]etxyl}aMMoniuM chloride;Diisobutylphe-noxyethoxyetxyldimetxylbenzylaMMoniuM chloride Monohydr
NA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) D-SerineD-蚕丝基酸10克BR，99%

绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞;U14-GFP3-流基炳全 3-(Mqthylthio)propioncldqhydq 368-49-3

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤细胞，SAC-IIB2细胞 VMR106细胞，大鼠细胞DL-ArginineDL-蛋白基酸5克BR，98%

人胚肺二倍体细胞;2BSSDS-PAGE蛋白质低分子量标准5克2～8℃

CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人细胞裂解液 (阳性对照) b-Glycerophosphatediwo7ium 10g/25g/100g/500g原装 Sigma G6251
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。