产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4142 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
副病毒4型PCR检测试剂盒说明书 | Parainfluenza Virus 4a (PIV4a)4aRTPCR | BKP4142 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:副病毒4型PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid 10097-02-6 中文名:2,2-二羟甲基丁酸 分子式:C6H12O4 FTFungalDNAKit 100T
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 34052-90-9 中文名:1,3-双(4,5-二氢-2-恶唑)苯 分子式:C12H12N2O2 十六烷基基溴化胺 50g
4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-环亚己基双苯酚 分子式:C18H20O2 CTAB 250g
2,2'-Dithiobisbenzanilide 135-57-9 中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫 分子式:C26H20N2O2S2 5’-三0酸胞苷三盐 50mg
Dimethylolurea 140-95-4 中文名:双羟甲脲 分子式:C3H8N2O3 CTP 100mg
RabbitE-SelectinELISAKit兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O
rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone 2011-66-7 中文名:2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮 分子式:C13H9ClN2O3
rabbitEsadiol,E2ELISAKit 兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 2-Acetamidothiazole 中文名:2-乙酰氨基噻唑 分子式:C5H6N2OS 度:99.0%
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Acetyl-3-ethylpyrazine 32974-92-8 中文名:2-乙酰基-3-乙基吡嗪 分子式:C8H10N2O
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0%
副病毒4型PCR检测试剂盒说明书非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A腐草霉素质量规格:≥97%,进分Phleomycin
ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人细胞裂解液 (阳性对照) 寡霉素质量规格:>92%,进分Oligomycin, from Streptomyces
小鼠纹状体神经元MN-s纺锤菌素质量规格:≥98%,进分Netropsin dihydrochloride
HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢菌素C锌盐质量规格:美国进口Cephalosporin C zinc salt
人胚;MRC-5精胺氮氧化加合物质量规格:美国进口Spermine NONOate
人肺鳞癌细胞;NCI-H520二本基脲,英文名或英文缩写:Dipxenylcartazide,级别:高,规格:100毫克
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-环已安基-2-羌基炳磺醋 (CAPSO) 3-(Cyclohqxylcmino)-2-xy7noxy-1-propcnqsulfonic ccid 73463-39-2
狗骨髓间质干细胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cellsIODOACETAMIDE代乙酰胺蛋白组学级米白色至黄色结晶粉末RTsigma
U87MG细胞,人恶性胶质母细胞瘤细胞 杂色曲霉 人气管上皮细胞RNAHTEpiC miRNA5 μgTEBUFFERPH8.0TE缓冲液生物技术级100MLRT
SF17(人细胞) 5×106cells/瓶×21277-49-21-二茂铁基乙醇1-(Ferrocenyl)ethanol