产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4114 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
恙虫病东方体PCR检测试剂盒说明书 | Orientia tsutsugamushiPCR | BKP4114 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
非洲绿猴肾细胞;VEROBenzethoniumchloride海胺16221公斤试剂级
LRG1 Others Human 人 LRG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3
眼晶状体上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)钼 MolybdqnuM 7439-98-7
Jurkat E6-1细胞,人T细胞瘤 人癌细胞,4T1细胞 上皮细胞生长添加物-2EpiCGS-26-甲基25克
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S2(3-7万)(多聚-L-赖酸)
AAV-293细胞,人人胚肾细胞 大鼠心肌细胞,H9c2(2-1)细胞 CL-0332Dami(人巨核细胞细胞)5×106cells/瓶×2盐酸卡替洛尔(标准品)2(1H)-QUINOLINONE质量规格:鉴别
BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2二甲磺酸阿米三嗪(标准品)Almitrine Bismesylate质量规格:含量测定
HMEpC-c 人类上皮细胞(HMEpC) 500,000cells 人神经细胞HN萝巴新(标准品)Raubasine质量规格:含量测定
原代肝实质细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml卡莫氟(标准品)Carmofur质量规格:供HPLC法含量测定用
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼可占替诺(烟酸占替诺)标准品Xanthinol nicotinate质量规格:供HPLC法含量测定用
恙虫病东方体PCR检测试剂盒说明书LS180细胞,人腺癌细胞 人眼脉络色素瘤细胞,MuM-2B细胞 人脑星形胶质母细胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004质量规格:>98%,PDE4和TNF-α抑制剂
HGC-27(人细胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇(标准品)TRISTEARIN质量规格:鉴别
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸替扎尼定(标准品)Tizanidine hydrochloride质量规格:HPLC法含量测定
人肺微内皮细胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A Hydrochloride质量规格:>98%,HDAC6抑制剂
CASK Others Human 人 CASK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸莫索尼定(标准品)Moxonidine hydrochloride质量规格:含量测定
尿道上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)2′-脱氧胞苷-5′-三嶙酸三钠盐25克
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-录-1-羌基本并三氮坐 (Cl-HOBt) (2-8℃) 6-Chloro-1-xy7noxibqnzotriczol 6198-19-6
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1GUANIDINExy7noCHLORIDE盐酸胍蛋白组学级250G1950-1-1RT
973细胞,人细胞 小鼠成骨细胞系,MC3T3-E1细胞 CL-0138Lec1(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2琼脂糖凝胶6Bshēng huà shì jì容量:20KU
THP-1(人髓系单核细胞) 5×106cells/瓶×2POPSO 25g/100g原装 Amresco J597
特点优势:
1. 特异性:恙虫病东方体PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。