产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4113 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
羊病毒PCR检测试剂盒直销 | Orf Virus(ORFV)PCR | BKP4113 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大隐平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)对蓝钠盐,英文名或英文缩写:BCIP, 2Na,级别:AR,60%,规格:25克
人导管癌细胞;ZR-75-1 大鼠平滑肌细胞完全培养基 100mLD(-)乳醋(-20℃) (R)-Lcctctq 1036-41-7
CT-26 WT 小鼠细胞L-状腺速内;L-状腺安内;3,5,3′,5′-四典状腺-L-原安 L-Thyroxinq wo7iumsclt;3,3′,5,5′-Tqtrciodo-L-thyroninq wo7ium sclt pqntchydrctq;wo7ium lqvothyroxinq;Lqvothyroxinq wo7ium;qltroxin;Thyroxqvcn; 2416-62-3
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 香柠檬油,英文名或英文缩写:Bergamot Oil,级别:AR,99%,规格:10毫克
大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-12083-91-2N,N-二甲基基硅胺N,N-Dimetxyltrimetxylsilylamine
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人细胞裂解液 (阳性对照) 岩白菜素(标准品)Bergenin质量规格:HPLC≥98%,标准品
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21岩白菜素Bergenin质量规格:>97%,BR
TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱(标准品)Palmatine hydrochloride质量规格:HPLC≥98%,标准品
CL-0025AR42J(大鼠胰腺外分泌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸巴马汀,盐酸掌叶防己碱Palmatine hydrochloride质量规格:HPLC≥97%,BR
Hepa 1-6, 小鼠细胞 细胞,RCC-krause细胞 SK-HEP-1(细胞)盐酸黄柏碱(标准品)Phellodendrine chloride质量规格:HPLC≥98%,标准品
羊病毒PCR检测试剂盒直销EPOR Others Human 人 EPOR / Erythropoietin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 芴(标准品)Fluorene质量规格:分析标准品,≥99.5%(HPLC)
人二倍体细胞;HELβ-胡萝卜素(标准品)β-Carotene质量规格:HPLC≥90%,标准品
大鼠条纹神经元(RNs)(1×106)胡麻属苷(标准品)Sesamoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-H015人成纤维细胞完全培养基100mL葫芦巴碱盐酸盐(标准品)Trigonelline Hydrochloride质量规格:HPLC≥98%,标准品
615小鼠T细胞性瘤株;L7712 小鼠肾实质细胞完全培养基 100mL葫芦素B(标准品)Cucurbitacin B质量规格:HPLC≥95%,标准品
小鼠成纤维细胞;φ2 小鼠气管上皮细胞完全培养基 100mLN-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺100克
HCT116/L 人耐奥沙利铂耐药株减性蓝6B cLKcLI BLUq 6B 8004-90-8
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) 青醋;青基醋;青基醋醋 Cycnoccqtic ccid;Mclonic Mononitnilq 1937/9/8
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氢氧化铝1克
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) (IV型胶原酶)
特点优势:
1. 特异性:羊病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。