同绵羊肺腺瘤病病毒PCR检测试剂盒说明书【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

【产品名称】: 同绵羊肺腺瘤病病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Ovine pulmonary adenocarcinoma virus（OPAV，JSRV）RTPCR
【货号】: BKP4134
组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

同绵羊肺腺瘤病病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  26905-70-4  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠汉坦病毒（HV）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-41-0  中文名：  分子式：C10H14N2O6S3  度：98.0%  关键词：    小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名：  分子式：C50H93NO9  度：96.0%  关键词：  神经酰胺; 脑苷脂; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  154801-30-6  中文名：  分子式：C42H85NO5  度：96.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠过敏/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  65872-41-5  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%      小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
P 物质 (Substance P)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Anthraflavic acid  中文名：二羟蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%

OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender  3-Methoxyfuran  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%

N-三(羟甲基)甲基甘酸   500g  3-Amino-5-phenylpyrazole  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3  度：98.0%

NeomycinSulfate   25g                 Zidovudine  30516-87-1  中文名：齐多夫定  分子式：C10H13N5O4 

N-Dodecyl-β-Maltoside  Zidovudine  中文名：齐多夫定  分子式：C10H13N5O4
猴肾细胞;Vero IgCD4烟曲霉素质量规格：>98%,进分Fumagillin from Aspergillus fumigatus

IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人细胞裂解液 (阳性对照) 寡霉素B质量规格：>97%,进分Oligomycin B from Streptomyces

猪细胞;ST棒曲霉素质量规格：>98%,进口Patulin from Penicillium expansum

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-溴二苯甲酮 质量规格：>97%,原装进口3-Bromobenzophenone

人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL1丙基-β-D-吡喃半乳糖苷质量规格：>98%,BRALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE
同绵羊肺腺瘤病病毒PCR检测试剂盒说明书人胚;MRC-53,6-二甲基-1,4-二氧杂环-2,5-二酮，英文名或英文缩写：DL-Lactide，级别：CP，99%，规格：250毫克

PROS1 Others Human 人 PROS1 / Protein S 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-录-5-肖基本全 2-Chloro-5-nitnobqnzcldqhydq 6361/1/3

CL-0335EB (NBL-4) (牛胚气管细胞)5×106cells/瓶×23，4-二录，英文名或英文缩写：3,4-Dichlorobenzdehyde，级别：特，99%，规格：100克

45.6.TG1.7细胞，细胞 人T细胞细胞,HuT 78细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0901吲哚试剂(Kovacs)shēng huà shì jì容量：RT1米

293(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2540-84-12,2,4-基;2,2,4-Trimetxylpentane

PCR检测试剂盒

 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。