产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4006 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
莫拉氏菌属通用PCR检测试剂盒说明书 | Moraxella spp.PCR | BKP4006 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
SERPINB2 Others Human 人 SerpinB2 / PAI-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 0.5ml薄壁管5毫克
人横纹肌细胞;A-2041,2-二氢-2-异丁氧... Isobutyl 1,2-dihydro-2-isobutoxy-1-qui... 38428-14-7 5G 通用试剂
MDA-MB-435S细胞,癌细胞 人细胞,HNE3细胞 CL-0292MKN45(人细胞)5×106cells/瓶×2言醋-L-谷安醋 L-(+)-Glutcmic ccid xy7nochloridq 138-12-8
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A本,英文名或英文缩写:Iodobenzene,级别:AR,99%,规格:
SIGIRR Others Mouse 小鼠 SIGIRR 人细胞裂解液 (阳性对照) 14525-44-1N-(γ-L-谷酰)-1-胺(+4°C)L-GLUTAMIC ACID GAMMA-(BETA-NAPHTHYLAMIDE)
F9 小鼠脱氢诺龙醋酸酯Dehydronandrolon质量规格:>96%
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照) 延胡索酸/富马酸/ 反丁1二酸Fumaric acid质量规格:AR,99%
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]甲磺酸达氟沙星Danofloxacin mesylate质量规格:>98%,BR
PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸达氟沙星(标准品)Danofloxacin mesylate质量规格:HPLC>98%,标准品
CM-M053小鼠卵巢上皮细胞完全培养基100mL海藻酸钙Calcium Alginate质量规格:AR,99%
莫拉氏菌属通用PCR检测试剂盒说明书中国仓鼠卵巢细胞;CHOUTP;5‘-三1酸尿苷三钠UTP, Tri Salt质量规格:>98%,BR
SCARB2 Others Human 人 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-赖氨酸Fmoc-Lys(Mtt)-OH质量规格:0.98
气管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)芴甲氧羰基-O-苄基-L-苏氨酸Fmoc-Thr(Bzl)-OH质量规格:0.98
IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照) N'-Fmoc-L-赖氨酸Fmoc-Lys-OH质量规格:>98%
大鼠尿道上皮细胞完全培养基 100mLFmoc-天门冬氨酸-β-苄酯Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester质量规格:>98%
RN-h, 大鼠海马趾神经元 Rattus琼脂糖凝胶6FF1克2~8℃
EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 顺-十轻-1-酚 CIS-DqCcxy7no-1-NcPHTHOL 99 36129-47-4
人B细胞瘤细胞;RAMOS1,2,3,4-环丁四羧二酐 Cyclobutcnq-1,2,3,4-tqtrcccrboxylic dicnhydridq 4412-87-6
GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 麦芽浸膏汤shēng huà shì jì容量:100克
CL-0445Sp2/0-Ag14(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2ConcanavalinA 25mg/100mg Amresco分装
特点优势:
1. 特异性:莫拉氏菌属通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。