PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：折光马尔太虫PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-1A3酚酞单嶙酸二环己盐，英文名或英文缩写：pxenolphthalein monophosphate bis(cyclohexylammonium) salt，级别：试剂级，95%，规格：500毫克

TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 邻基队本二酚 2-Mqthylxy7noinoneonq 92-71-6

膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)嗜热菌蛋白酶，英文名或英文缩写：Thermolysin from Bacillus thermoproteolyticus rokko，级别：生物技术级，30u/mg，规格：25克

EC-304细胞，人内皮细胞 小鼠细胞,Kert-3细胞 人脉络丛上皮细胞总RNAHCPEpiC NA对羟基，英文名或英文缩写：PHBA，级别：BR，99%，分子量600，液体，规格：5克

QG-56(人肺扁平上皮癌细胞) 5×106cells/瓶×281-30-11,4,5,8-四二酐1,4,5,8-tetracarboxylic dianhydride
HCT 116细胞，细胞 人细胞,Bel-7404细胞 CL-0016A549(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2外消旋5-羧基托特罗定rac 5-Carboxy Tolterodine质量规格：美国进口

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-R-(+)-托特罗定R-(+)-Tolterodine质量规格：美国进口

CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-5-羟甲基托特罗定(R)-5-Hydroxymethyl Tolterodine质量规格：美国进口

小梁网细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)托吡酯-d12Topiramate-d12质量规格：美国进口

MZB1 Others Human 人 MZB1 / PERP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-去亚异丙基托吡酯2,3-Desisopropylidene Topiramate质量规格：美国进口
折光马尔太虫PCR检测试剂盒价格豹猫肺成纤维样细胞;LCL3BOC-D-丝氨酸甲酯BOC-D-Serine methyl ester质量规格：>98%,BR

CNE1, 人细胞系BOC 精氨酸Boc-Arg(Pbf)-OH质量规格：0.98

人纤维细胞;HT-1080 大鼠肠平滑肌细胞完全培养基 100mLBMS-345541BMS345541质量规格：>98%,BR

脑内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)IKK-16,选择性IKK抑制剂IKK16质量规格：>98%,BR

PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲格列汀琥珀酸盐 Trelagliptin succinate；SYR-472质量规格：>98%,BR
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2'-双(羟甲基)二苯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,2'-Bis(hydroxymethyl)diphenyl Ether

人外根壳细胞RNAHHORSC miRNA5 μg双(2-甲酰苯基)(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Bis(2-formylphenyl) Ether

CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-双(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T))质量规格：>98.0%(GC)(T)1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene

人脐平滑肌细胞完全培养基 100mL4-氨基-4'-氯二苯(>97.0%(GC)(T))质量规格：>97.0%(GC)(T)4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether

BRL大鼠Buffalo细胞，大鼠肝细胞 SH-SY5Y(神经母细胞瘤细胞) 人肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H2921,4,8,12-四氮杂环十五烷(>97.0%(T))质量规格：>97.0%(T)1,4,8,12-Tetraazacyclopentadecane
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。