产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3975 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
马立克氏病病毒PCR检测试剂盒供应 | Marek's Disease Virus(MDV)PCR | BKP3975 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:马立克氏病病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合钼酸1克BR,98%
CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2,4-本三加醋 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 28-44-9
HGC-27 人细胞(未分化)矿物油 Minqrcl Oil 804-47-2
HuT 78人T细胞细胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培养基+20%FBS4-nitnopxenol对硝基酚5克BS,85%
VEGFA Protein Human 重组人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白GDX 104(聚二本多孔小球)NA
HCT-8 [HRT-18]人回盲细胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells 1640+10% FBS盐酸硫必利(标准品)Tiapride hydrochloride质量规格:UV法含量测定
IFNG Protein Rat 重组大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 标签)甲基橙皮甙Methyl hesperidin质量规格:≥95%
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14) 5×106cells/瓶×2 CHO(中国仓鼠卵巢细胞)吗多明Molsidomine质量规格:>98%,BR
原代骨细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml吗多明(标准品)Molsidomine质量规格:含量测定
RK2 Others Canine 狗 kB / RK2 人细胞裂解液 (阳性对照) O,P-滴滴滴(标准品)Mitotane;O,P'-DDD质量规格:含量测定
马立克氏病病毒PCR检测试剂盒供应人细胞;CNE-2Z 大鼠肾上皮细胞完全培养基 100mL十一1酸锌Zinc undecylenate质量规格:>98%
NG108-15 大鼠小鼠杂合神经细胞氨甲酰甲胆碱;氯贝胆碱Carbamyl-β-methylcholine chloride 质量规格:>99%,美国进口
IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人细胞裂解液 (阳性对照) 茄尼醇(标准品)Solanesol质量规格:HPLC≥97%,标准品
人;Calu-3大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品)Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
PRLR Others Rat 大鼠 PRLR / Prolactin receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 秦皮苷(标准品)Fraxin质量规格:HPLC≥98%,标准品
L6565细胞,小鼠克隆细胞系 破杆菌/梭菌Closidium tetani 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞;RF/6A4-硝基芘(>97.0%(HPLC))质量规格:>97.0%(HPLC)4-Nitropyrene
CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 标签)2-氨基芴(>97.0%(T))质量规格:>97.0%(T)2-Aminofluorene
PIEC(猪髋动脉内皮细胞 ) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基-9-芴酮(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)2-Amino-9-fluorenone
人细胞;Hela P10s-11F2-氨基-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC)(T))质量规格:>98.0%(HPLC)(T)2-Amino-9,9-dimethylfluorene
CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-代戊炔(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)1-Pentynyl Iodide