技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：反刍兽曼氏杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
SMR3B Others Human 人 SMR3B 人细胞裂解液 (阳性对照) 马尿酸-L-本酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25毫克

CL-0029B16(小鼠色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2变色素2R Chromotrope 2R 4197-7-3 1G 通用试剂

H4细胞，人 人大动脉平滑肌细胞,HASMC细胞 正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F酪蛋柏胨 IRON PqPTONcTq 91079-40-

BSC-1(猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-基葡萄糖shēng huà shì jì容量：RT25克

COMP Others Human 人 COMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 12501-23-41钨酸Phosphotungstic acid
Hela, 人细胞系 Human盐酸贝那普利/苯那普利Benazepril Hydrochloride质量规格：>98%,BR

ADIPOQ Others Mouse 小鼠 ADIPOQ / ACDC / Adiponectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸贝那普利/苯那普利(标准品)Benazepril Hydrochloride质量规格：含量测定

铁硒传递蛋白 100xITS苯扎贝特Bezafibrate质量规格：>98%

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯扎贝特（标准品）Bezafibrate质量规格：HPLC>98%,标准品

人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH布南色林Blonanserin质量规格：>99%
反刍兽曼氏杆菌PCR检测试剂盒直销FGF6 Protein Human 重组人 FGF6 / FGF-6 蛋白5-甲酰水杨酸5-Formylsalicylic acid质量规格：>97%

B16-F10(小鼠皮肤色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人小神经胶质细胞HM阿脲Alloxan, monohydrate质量规格：>98%,进分

人肺动脉成纤维细胞总RNAHPAF NA柠檬酸二铵,柠檬酸氢二铵Ammonium , dibasic质量规格：>99%,AR

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人细胞裂解液 (阳性对照) 乳酸钙五水(>98%,USP)Calcium (L)-lactate, pentahydrate质量规格：>98%,USP

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS32'-脱氧胸苷-5'-一1酸二钠盐dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt质量规格：>97%,分子生物学级
PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin莱苞迪甙A质量规格：>98%,BRRebaudioside A

IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签)莱苞迪甙A（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Rebaudioside A

人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus环亮氨酸甲酯盐酸盐质量规格：>98%Cycloleucine Methyl Ester.HCl

兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2水溶性四氮唑-3质量规格：BRGLT003

IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人细胞裂解液 (阳性对照) 表儿茶素没食子酸酯(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品(?)-Epicatechin gallate/ECG