产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3965 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
马鼻疽杆菌PCR检测试剂盒直销 | Malleomyces malleiPCR | BKP3965 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
特点优势:
1. 特异性:马鼻疽杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22SILVERnitnATE肖酸银蛋白组学级100GRT
HNE2-LMP1/2细胞,人细胞系 小鼠细胞,H22细胞 CM-H071人肾动脉平滑肌细胞完全培养基100mL流醋轻铵;重流醋铵;醋性流醋铵 cMMoniuM bisulfctq;cMMoniuM ccid sulfctq;ccid cMMoniuM sulfctq 7803-63-6
OS-RC-2(人细胞) 5×106cells/瓶×2丁二醋二丁酯 Dibutyl succinctq 141-03-7
Promocell C-27101 Chondrocyte Growth Medium, 软骨细胞生长培养基(即用型) 500mlwo7iumoxalate乙二酸钠500克工艺级,90%
骨骼肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)403-43-0对扶本甲酰录4-Fluorobenzoyl chloride
HFDPC-c 人类的毛细胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铱标准溶液(1000μg/ml,基质:2.0mol/L盐酸)Iridium standard solution质量规格:1000μg/ml,基质:2.0mol/L盐酸
平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)镍标准溶液(500mg/L,溶剂:1%硝酸)Nickel standard质量规格:500mg/L,溶剂:1%硝酸
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 钾标准溶液(100μg/mL,基体:1%HCl)Potassium standard质量规格:100μg/mL,基体:1%HCl
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA镨标准溶液(1000μg/mL,基体:10%HCl)Praseodymium standard质量规格:1000μg/mL,基体:10%HCl
中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr- 喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞 SF-9细胞,昆虫细胞系钨标准溶液(1000μg/ml,基体:0.1mol/LNaOH)Tungsten solution质量规格:1000μg/ml,基体:0.1mol/LNaOH
马鼻疽杆菌PCR检测试剂盒直销STO(小鼠胚成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL18RAP / IL1R7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 变色酸钠,铬变酸二钠Chromotropic acid di salt dihydrate质量规格:AR
人虹膜色素上皮细胞HIPEpiC溴百里酚蓝钠盐Bromothymol blue salt质量规格:AR
EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人细胞裂解液 (阳性对照) 特地唑胺游离碱Tedizolid free base质量规格:>98%,BR
大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL特地唑胺;特地唑胺1酸酯Tedizolid phosphate;TR-701FA质量规格:>99%;BR
CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性细胞T细胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 灭活血清3-甲基-2-苯并噻唑酮腙盐酸盐,水合MBTH hydrochloride hydrate质量规格:>98%,BR
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7 小鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mLD-醇(标准品)质量规格:95%,标准品D-Pinitol
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human果菊苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Echinacoside
MEP1A Others Human 人 MEP1A / PPHA 人细胞裂解液 (阳性对照) 萝酸(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Usnic acid
人主动脉内皮细胞裂解物HAECL酸枣仁皂苷A(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Jujuboside A
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人细胞裂解液 (阳性对照) D-焦谷氨酸(标准品)质量规格:HPLC法有关物质检查D-Pyroglutamic acid
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。