PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：梅恩君病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

大鼠细胞;IR983F100克

CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-苏酸 DL-Theronine,≥90% 80-68-2 25G 通用试剂

间充质干细胞培养基MSCM-prf异炳基环;六轻异炳本;六轻枯1;2-环己基炳烷 Isopropylcyclohqxcnq;Hqxcxy7nocuMqnq;2-Cyclohqxylpropcnq 696-9-7

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 本二酸氢钠，英文名或英文缩写：wo7ium xy7nogen phthalate，级别：AR，规格：5克

EB病毒转化的人B细胞;KMYM556-50-3甘酰甘酸;甘胜;双甘肽;一缩二基乙酸Glycylglycine;Diglycine
HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (分析标准品,>99.5%(GC))Lauric acid质量规格：分析标准品,>99.5%(GC)

CL-0153MDBK(牛肾细胞)5×106cells/瓶×2神经酸(分析标准品,≥99.0%(GC))Nervonic acid质量规格：分析标准品,≥99.0%(GC)

MGC80-3(MGC-803)人细胞 细胞，Coc2细胞 HEC-1-B(子宫内膜腺癌细胞)十五烷酸(分析标准品,≥99.5%(GC))Pentadecanoic Acid质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)

人非小细胞;NCI-H1975泛酸钙一水合物(标准品)(+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate质量规格：分析标准品

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 山梨酸钾(标准品)Potassium sorbate质量规格：分析标准品
梅恩君病毒PCR检测试剂盒价格AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人细胞裂解液 (阳性对照) 胆戊基碳酸酯Cholesterol Amyl Carbonate质量规格：

人肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL胆正辛基碳酸酯Cholesterol n-Octyl Carbonate质量规格：

NFS-60细胞，小鼠细胞G-CSF依赖性 HeLa [ Chang Liver ](张氏肝细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1胆己基碳酸酯Cholesterol Hexyl Carbonate质量规格：

XCL2 Protein Human 重组人 XCL2 蛋白 (His 标签)4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC))Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl Carbonate质量规格：>95.0%(HPLC)

PK-15(猪肾细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T))Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate质量规格：>98.0%(T)
HUVEC细胞，人脐内皮细胞 人肝细胞正常,HL-7702细胞 CL-0072Daudi(人瘤细胞)5×106cells/瓶×2光甘草定质量规格：HPLC≥98%，标准品Glabridin

人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1鬼臼（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Podophyllotoxin

TFPI Others Human 人 TFPI 人细胞裂解液 (阳性对照) 鬼臼(95%)质量规格：HPLC>95%,BRPodophyllotoxin

肾实质细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)鬼臼(85%)质量规格：>85%,BRPodophyllotoxin

TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人细胞裂解液 (阳性对照) β-淀粉样蛋白(25-35)质量规格：>95%,BRβ-Amyloid (25-35)
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。