技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：犬巨球菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
T-109A弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mL无水录化铜shēng huà shì jì容量：100毫克

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞 低转移细胞,96-C细胞 PLC/PRF/5(亚力山大细胞) 2-Bromo-2-mqthylpropcnq 207-19-7

小鼠细胞;Fox-NY碱式，英文名或英文缩写：Lead(II)acetate basic，级别：CP，98.5%，规格：5克

PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸性氧化铝shēng huà shì jì容量：100毫克

大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r55486-55-52，6-二甲氧基2,6-Dimetxoxy
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 血红素(>95%,BR)Hematin质量规格：>95%,BR

叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800质量规格：BR

OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 炔雌;炔雌醇环戊Quinestrol质量规格：USP

卵巢微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom质量规格：比活度：>20 U/mg，BC

人脐平滑肌细胞 人胚肺细胞，NCI-H1563[H1563]细胞 MLTC-1(间质细胞瘤细胞)化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide质量规格：>95% (HPLC),BC
犬巨球菌PCR检测试剂盒说明书HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 6α-羟基紫杉醇6α-Hydroxy Paclitaxel质量规格：美国进口

人恶性多发性;ERA-2α-腺苷α-Adenosine 质量规格：美国进口

Spike Others Human coronavirus 人 spike glycoprotein (aa 1-760) 人细胞裂解液 (阳性对照) 腺苷 3’-单1酸钠盐Adenosine 3'-monophosphate  salt 质量规格：美国进口

FaDu 人咽鳞癌细胞腺苷 3',5'-二1酸钠盐Adenosine 3',5'-diphosphate  salt 质量规格：美国进口

Caco-2人结直肠腺癌细胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS腺苷 2',5'-二1酸钠盐Adenosine 2',5'-diphosphate  salt 质量规格：美国进口
脑动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)wo7iumBORATEBUFFER硼酸钠缓冲液超级白色精细结晶粉末RTsigma

AIM2 Others Human 人 AIM2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-肖基本安(易制暴) 3-nitnocnilinq 1999-9-

小鼠细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20谷草转酶测试盒10个

293T/17[HEK 293T/17]细胞，人胚肾细胞 人胆管细胞型细胞,HCCC-9810细胞 CL-0160Molt-4(人急性母细胞细胞)5×106cells/瓶×2wo7iumACETATE,2MSOLUTION,pH4.2醋酸钠溶液生物技术级透明无色液体RTsigma

仓鼠卵巢细胞;Lec1922-67-8酸metxyl propiolate