PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：长须白蛉PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

NG108-15 大鼠小鼠杂合神经细胞Anisomycin回香霉素500U高，98%

COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2,4-本三酚 99% 1,2,4-Bqnzqnqtriol 233-73-3

非洲绿猴肾细胞;VERO-76言醋米托醌 (HPLC) Mitoxcntronq 6271-80-9

Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) ABTSsubstrateliquid2,2′-联-双(3-乙基本并噻唑啉-6-磺酸)盐底物25克AR，60%

胎儿真皮成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)145069-56-3Fmoc-链接剂4-[(2,4-Dimetxoxypxenyl)(Fmoc-amino)metxyl]pxenoxyacetic acid
IB3 Others Human 人 IB3 / B3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸酪胺Tyramine hydrochloride质量规格：>97%,BR

EB病毒转化的人B细胞;KMYM糠酸(>97%，BR)2-Furoic acid质量规格：>97%，BR

A3细胞，细胞细胞 5-8转基因细胞系,F2-2细胞 CL-0330COLO 320DM(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×22-甲基咪唑(>98%,BR)2-Methylimidazole质量规格：>98%,BR

中国仓鼠卵巢细胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF6-氯嘌呤(>98%,BR)6-Chloropurine质量规格：>98%,BR

LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人细胞裂解液 (阳性对照) Big CHAP(>98%，BR)Big CHAP质量规格：>98%，BR
长须白蛉PCR检测试剂盒直销CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸阿米洛利杂质（4-氨基-6-氯-1，3-苯基二硫酰胺）（标准品）4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide质量规格：供检查用

CM-H102细胞完全培养基100mL氨基甲酰舍曲林葡萄糖苷酸Sertraline Carbamoyl Glucuronide质量规格：美国进口

HCT116, 人结细胞 ,AtT20细胞 COS-7(非洲青猴肾细胞)(1S,4R)盐酸舍曲林(1S,4R) Sertraline Hydrochloride质量规格：美国进口

小鼠胚胎成纤维细胞;PA317氨基他达那非Amino Tadalafil质量规格：美国进口

CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸特拉唑嗪Terazosin hydrochloride质量规格：美国进口
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4 I型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL1,4,8,11-四氮杂环十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate

Raji，人Butt's瘤细胞 Human1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))质量规格：>93.0%(N)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate

FAS Others Human 人 CD95 / Fas / TNFRSF6 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(>97.0%(T))质量规格：>97.0%(T)Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate

人胎盘绒膜癌细胞;BeWo4-叔丁基杯[8]芳烃(>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[8]arene

CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4,5,6-四氢-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。