【产品名称】: 跳跃病病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Louping Ill VirusRTPCR
【货号】: BKP3950

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

跳跃病病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴绿-甲基红指示剂芬枕，英文名或英文缩写：metxyl Red mixed indicator powder，级别：BR，95%，规格：100克

人肺大内皮细胞完全培养基 100mL头孢炳1(Z)-异构体 Cqfprozil (Z)-IsoMqr 1141-77-9

SK-MEL-1细胞，人皮肤色素瘤细胞 德氏乳杆菌乳酸亚种 人十二脂肠腺癌;HuTu-80GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH盐酸胍技术级白色至微黄色颗粒结晶粉末RTsigma

ANGPTL7 Protein Canine 重组狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 标签)EDTA-2K乙二安四乙酸钾25克高，73%

KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 69610-40-8Boc-L-脯醇(S)-(-)-1-Boc-2-pyrrolidinemetxanol
IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 标签)盐酸奈福泮（标准品）Nefopam HCl质量规格：含量测定

LLC-WRC 256(大鼠腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中国仓鼠肺细胞)甲睾酮; 甲基素（标准品）17-Methyltestosterone质量规格：含量测定

原代上皮细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml布美他尼;丁苯氧酸（标准品）Bumetanide质量规格：含量测定

BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氨甲环酸（标准品）Tranexamic acid质量规格：>98%,标准品

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1氨甲环酸Tranexamic acid质量规格：>98%,BR
EFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 标签)多沙普仑Doxapram质量规格：美国进口

BGC-803(人细胞) 5×106cells/瓶×2 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1奥沙利铂（标准品）Oxaliplatin质量规格：HPLC>98%,标准品

人肝内胆管上皮细胞HIBEpiC硝酸奥昔康唑Oxiconazole Nitrate质量规格：度>99%

SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸土霉素Oxytetracycline HCl质量规格：>95%,BR

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S2盐酸土霉素(标准品)Oxytetracycline HCl质量规格：效价测定
跳跃病病毒PCR检测试剂盒说明书PG细胞，人肺巨细胞癌 小鼠巨噬细胞,Ana-1细胞 CM-R119大鼠晶状体上皮细胞完全培养基100mLR-羟基托吡酯质量规格：美国进口R-Hydroxy Topiramate

RWPE1(人上皮细胞) 5×106cells/瓶×2S-羟基托吡酯质量规格：美国进口S-Hydroxy Topiramate

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kitD-盐酸伐昔洛韦质量规格：美国进口D-Valacyclovir Hydrochloride

人雪旺细胞总RNAHSC NA伐昔洛韦杂质F质量规格：美国进口Valacyclovir Impurity F

小鼠小神经胶质细胞(MM)(5×105)4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4,5-Difluorophthalonitrile
PCR检测试剂盒

跳跃病病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。