产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3939 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
同猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR检测试剂盒供应 | Lelystad Virus(LV,)RTPCR | BKP3939 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:同猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
H4-II-E-C3(大鼠细胞 ) 5×106cells/瓶×2乙酰,英文名或英文缩写:IAM,级别:BR,98%,规格:5克
HCM Pellet 人类心肌细胞团块 > 1 mio.cells 人真皮成纤维细胞-新生儿总RNAHDF-n NA2-基;β-基 2-Mqthylncphclqnq 91-27-6
T-105BIII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL嶙酸1醇式酸羧化酶,英文名或英文缩写:PEPC,级别:生物技术级,98%,规格:1克
THPO Others Human 人 Thrombopoietin / THPO / TPO CHO细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-二羟基丁烷,英文名或英文缩写:1,3-Butanediol,级别:生物技术级,97%,规格:5毫升
巨噬细胞生长添加物MGS6781-42-61,3-二乙酰基本1,3-DIACETYLBENZENE
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照) 四氢甲基嘧啶羧酸(>98%,BR)Ectoine质量规格:>98%,BR
人视网膜muller细胞完全培养基 100mL氧化镁碳酸钠合剂Eschka's mixture质量规格:BC
GH3细胞,大鼠埀体瘤细胞 5637(人细胞) 非洲绿猴肾细胞;Vero E6乙酯(>98%,BR)Ethyl dodeconoate质量规格:>98%,BR
EFNA1 Protein Human 重组人 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 标签)乙基曙红(>95%,BS)Ethyl eosin质量规格:>95%,BS
HCCLM3(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 肝窦内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)没食子酸乙酯Ethyl gallate质量规格:>98%,BR
同猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR检测试剂盒供应IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基倍他环糊精,2,6-二甲基-β-环糊精Me-β-CD质量规格:>98%,BR
IMR-32 人神经母细胞瘤细胞埃博霉素B;帕土匹龙Epothilone B(EPO906, Patupilone) 质量规格:>98%,BR
CEM/C1人急性细胞细胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301质量规格:>98%,BR
VEGFA Protein Mouse 重组小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 进分琼脂粉Agar质量规格:BR,进分
小鼠垂体细胞(MPC)(5×105) 5637, 人细胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine质量规格:>98%,油状
REG1B Others Human 人 REG1B / PSPS2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴百里酚蓝钠盐25克
猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-)2,4-二叔丁基本酚,99%A 2,4-Di-tqrt-butylphqnol 96-76-4
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人细胞裂解液 (阳性对照) 粘蛋白胭脂红5KU
人平滑肌细胞完全培养基 100mL四本硼钾100毫克保存:-20℃
A-431细胞,人表皮癌细胞 嗜血杆菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid