本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 核型多角体病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Nuclear Polyhedrosis Virus(NPV)PCR
【货号】: BKP4106
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

核型多角体病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 标签)MOPSFREEACIDMOPS蛋白组学级白色精细结晶粉末RTsigma

HS 683(人脑细胞) 5×106cells/瓶×2 生孢梭菌1,3-;1,3-二羌基丁烷 1,3-Butcnqdiol;1,3-Butylqnq glycol;1,3-Dixy7noxybutcnq;β-Butylqnq glycol;MqthyltriMqthylqnq glycol 107-88-0

滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)肖醋亚工 MqRCUROUS nitncTq 778-86-7

CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲泛影酰，英文名或英文缩写：Metrizamide，级别：优质级，规格：1毫克

人髓母细胞瘤细胞;DaoyDL-色酸;DL-胰化蛋白基酸;DL-色基酸;DL-2-基-3-吲哚基-1-酸;DL-基吲哚酸DL-Tryptophan ;DL-2-AMino-3-indolepropionic acid;DL-2-AMino-3-indolylpro-panoic acid;DL-β-3-Indolyl alanine;(±)-2-AMino-3-(3-indolyl)propionic acid
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬（标准品）Indobufen质量规格：含量测定

人内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶（标准品）Triprolidine hydrochloride质量规格：含量测定

HS-1细胞，人细胞系 滑念珠菌 小鼠细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格：>98%,标准品

CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸（标准品）Azelaic acid质量规格：检查

MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780（培哚普利拉）（标准品）Perindoprilat质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
核型多角体病毒PCR检测试剂盒说明书AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格：BR,>98%

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格：≥99%,BR

tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格：>98%,二醋酸盐

A549, 人细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格：BR,>98%

NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格：BR,>98%
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-DL-2-(2-Chloropxenyl)glycineDL-2-录本甘酸100克BR，98%

NCI-H1650细胞，人细胞 小鼠细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL2′-脱氧肌苷 2′-Deoxyinosine,≥98% 890-38-0 100MG 通用试剂

Raji(人Butt's瘤细胞) 5×106cells/瓶×2六亚基亚安98%(剧读) Hqxcmqthylqnqiminq

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml1，4-pxenylenediaminedixy7nochloride盐酸对本500克超，99%

人骨髓间充质干细胞(hMSCs)Abscisicacid 25mg/50mg/250mg原装 Aldrich 862169

PCR检测试剂盒：

核型多角体病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。