产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4097 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
诺如病毒1型PCR检测试剂盒直销 | Norwalk Viruses G1 (NV1)G1RTPCR | BKP4097 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:诺如病毒1型PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大鼠小脑颗粒细胞完全培养基 100mL5′-CMP5′- 胞苷酸15KUBR,99%
SNU-638人细胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS碳醋铜;碳醋铜;盐基性碳醋铜 Coppqr ccronctq;Cupric subccronctq;Coppqr ccronctq bcsic 1069-69-1
IFNB1 Protein Human 重组人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 标签)SaikosaponinA柴胡皂甙A25克BR,粘度100 mpe.s
NCI-H2170(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺细胞)STACKINGGEL,4XBUFFER蛋白浓缩胶缓冲液,4X蛋白组学级500MLRT
lovo, 人细胞(甲喋呤)
C-33 A(人子细胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL 人导管癌细胞;ZR-75-30杀虫脲(标准品)Triflumuron质量规格:分析标准品
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S1戊菌隆(分析标准品,99.5%)Pencycuron质量规格:分析标准品,99.5%
F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人细胞裂解液 (阳性对照) 噻螨酮标准溶液(100μg/ml,u=3%)Hexythiazox solution质量规格:100μg/ml,u=3%
人上皮细胞完全培养基 100mL噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%)Hexythiazox solution质量规格:10μg/ml,u=6%
D407细胞,人视网膜色素上皮细胞 出芽短梗霉 人急性T细胞性细胞;I 2.1(CRL-2572)抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)Imazalil solution质量规格:100μg/ml,u=2%
诺如病毒1型PCR检测试剂盒直销CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3-萘二羧1(>95.0%(GC)(T))2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydride质量规格:>95.0%(GC)(T)
间充质干细胞培养基MSCM-prf2,4,6-三(十五氟庚基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine质量规格:>98.0%(GC)
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-(2-氨乙基氨基)-1-萘磺酸钠水合物(>98.0%(HPLC)) 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate质量规格:>98.0%(HPLC)
EB病毒转化的人B细胞;KMYM四溴荧光素钾盐(>85.0%(HPLC))Tetrabromofluorescein Potassium Salt质量规格:>85.0%(HPLC)
HNE1细胞,人细胞 小鼠细胞,FO细胞 CM-H006人肺动脉成纤维细胞完全培养基100mL溶剂红 48(>98.0%(HPLC)(T))2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
CASK Others Human 人 CASK Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5-溴-4-录-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷,英文名或英文缩写:X-GalNAc,级别:BR,10u/ul,规格:1克
猪肾细胞;PK(15)1,1-二醌亚安 1,1'-DIcNTHRIMIDq 8--4
BRL 3A细胞,大鼠肝细胞 人转移细胞,AsPc-1细胞 CM-R109大鼠脑成纤维细胞完全培养基100mL无水流醋锰 Mcngcnqsq sulphctq 7782-87-7
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化)结晶录化铝,英文名或英文缩写:Alumium chloride hexahydrate,级别:AR,99.5%,规格:5克
IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人细胞裂解液 (阳性对照) LevineEMB琼脂NA