本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 细颈线虫通用PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Nematodirus spp.PCR
【货号】: BKP4082
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

细颈线虫通用PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

CM-M088小鼠破骨细胞完全培养基100mL乙二酸锶，英文名或英文缩写：Strontium oxalate，级别：CP，69%，规格：250毫升

A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株 小细胞细胞,LIEP-P细胞 DT40(鸡瘤细胞)7-氧基-2-四轻同 7-Mqthoxy-2-tqtrclonq 4133-34-0

小鼠细胞;BC3H1(-)-薄荷醇，英文名或英文缩写：Menthol，级别：CP，70%，规格：25克

CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 2′-脱氧尿苷-5′-三嶙酸四钠盐5克

tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-1D3(15-30万)(多聚-L-赖酸)
CD69 Others Human 人 CD69 人细胞裂解液 (阳性对照) Tigecycline质量规格：含量>99.0%

小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32（标准品）Tigecycline质量规格：HPLC>98%,标准品

TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 替米考星Tilmicosin质量规格：干品度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34

原代肝实质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml替米考星(标准品)Tilmicosin质量规格：含量测定

RCC-krause细胞，细胞 人细胞,CaSKi细胞 人内根壳细胞总RNAHHIRSC NA马来酸噻吗洛尔Timolol Maleate质量规格：>99%,USP
细颈线虫通用PCR检测试剂盒说明书人上皮细胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌细胞完全培养基 100mL乙酰唑胺Acetazolamide质量规格：>99%

脑膜细胞培养基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)质量规格：>98.0%(T)

SCN3B Others Human 人 SCN3B 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并恶嗪-2-酮(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 质量规格：>98.0%(T)

大鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基 100mL4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 质量规格：>98.0%(HPLC)

BLU-87 人膀胱移行细胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (内含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(HPLC))
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羟甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸质量规格：>99%,ARTES

中国仓鼠卵巢细胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大细胞瘤细胞，P815细胞 INS-1细胞，大鼠细胞3-[ (N-三(羟甲基)甲氨基]-2-羟基丙磺酸钠质量规格：>98%,BRTAPSO mono

293来源病毒包装细胞;ΦA-GPTAPSO；3-[ (N-三(羟甲基)甲氨基]-2-羟基丙磺酸质量规格：>99%,BRTAPSO

STIM1 Others Human 人 STIM1 / GOK 人细胞裂解液 (阳性对照) N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸钠质量规格：>99%,BRTAPS  Salt

神经元细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)S-I-G-S-L-A-K质量规格：>95%,BRS-I-G-S-L-A-K

PCR检测试剂盒：

细颈线虫通用PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。