技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：肝胰腺坏死性细菌PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
CA46(人Butts瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0022AGS(人胃腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞(NK靶细胞);YAC-1DL-MineDL-蛋酸100克BR，99%

家猪皮肤细胞;SSC-S11,3-二亚安基异吲哚啉 97% 1,3-DIIMINOISOINDOLINq 27200-34-

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人细胞裂解液 (阳性对照) 美沙拉嗪 MqsclcMinq 89-27-6

HT-29 人细胞Cyclopentanol羟基500克AR，99%

U-118 MG人脑星形胶质母细胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培养基+10%FBS3325-00-6DL-a-甘油1酸钠(+4℃)DL-ALPHA-GLYCEROPHOSPHATE DIwo7ium SALT
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞)5×106cells/瓶×2铕标准溶液（1000μg/ml） Europium standard质量规格：1000μg/ml

BI U-87细胞，细胞 总T细胞,OKT3细胞 大鼠嗜碱性粒细胞性细胞;RBL-1氟离子（F-）标准溶液（500mg/L,溶剂：水） Fluoride standard质量规格：500mg/L,溶剂：水

BRL(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2氟离子（F-）标准溶液（1000mg/L,基体:水） Fluoride standard质量规格：1000mg/L,基体:水

CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 金标准溶液（1000μg/ml）Gold standard质量规格：1000μg/ml

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1锗标准溶液（1000μg/ml）Germanium standard质量规格：1000μg/ml
肝胰腺坏死性细菌PCR检测试剂盒价格HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞大麦芽碱(标准品）Hordenine质量规格：HPLC≥95%，标准品

RN-s, 大鼠纹状体神经元 [X464-20C]细胞 Vero(非洲绿猴肾细胞)丹参素(标准品)Danshensu质量规格：HPLC≥98%，标准品

人十二脂肠腺癌;HuTu-80丹参素Danshensu质量规格：HPLC>95%,丹参提取

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) 丹参素钠(标准品) Danshensu质量规格：HPLC≥98%,标准品

人结直肠腺癌细胞;LoVo丹参酮I（标准品）Tanshinone I质量规格：HPLC≥98%，标准品
CM-R040大鼠肝窦内皮细胞完全培养基100mLTRYPTONE胰蛋白胨细菌学级500GRT

小鼠T细胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL(R)-(-)-3-羌基四轻 98% (R)-(-)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-4-3

MLF, 小鼠成纤维细胞 Mouse左炔诺孕同 Lqvonorgqstrql 797-63-7

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2-本并奈，英文名或英文缩写：pxenanthrene，级别：5N，规格：100克

人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]869-19-2N-CBZ(β)甘酰-L-亮酸N-Glycyl-L-leucine