产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3971 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒供应 | Mannheimia varigenaPCR | BKP3971 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人细胞裂解液 (阳性对照) CarboxypeptidaseB精蛋白酶100克BR,99%
大鼠骨骼肌成肌细胞;L6二十二烷酸 Behenic acid,99% 112-85-6 1G 通用试剂
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 苏木色精;苏 HqMctoxylin;(Z)-11-HDOL;xy7noxybrcsilin;Ncturcl blcck-1;C.I.75290 217-8-
T-111A木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mLN-Acetyl-L-Glutamine茶酸100微克BR,98%
HB细胞,人细胞 人脐内皮细胞,HUVEC(原代)细胞 大鼠嗜碱性粒细胞性细胞;RBL-11707-03-5二本基1酸Dipxenylphosphinic acid
HEH 人胚胎组织来源细胞群勃龙醋酸酯 Revalor-H Trenbolone acetate质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养
CM-R083大鼠滑膜细胞完全培养基100mL水飞蓟宾(标准品)Silibinin质量规格:HPLC>97%,标准品
NCI-N87 [N87]人细胞水飞蓟宾Silibinin质量规格:>97%,BR
EB病毒转化的人B细胞;KMY0928 人前脂肪细胞完全培养基 100mL依泽替米贝;依折麦布Ezetimibe质量规格:>99%
小鼠星形胶质细胞MA依泽替米贝;依折麦布(标准品)Ezetimibe质量规格:HPLC>99%,标准品
异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒供应L W-3A 小鼠皮下结缔组织细胞羟基波生坦Hydroxy Bosentan质量规格:美国进口
CM-H067人肾系膜细胞完全培养基100mLN-去甲基克拉霉素N-Desmethyl Clarithromycin质量规格:美国进口
B16-F10, 小鼠色素瘤高转移细胞阿糖胞苷 5‘-单1酸盐Cytarabine 5'-Monophosphate质量规格:美国进口
人卵巢;PA-1 人视网膜muller细胞完全培养基 100mL达卡巴嗪-d6Dacarbazine-d6质量规格:美国进口
人表皮色素细胞-浅色素cDNAHEM-l cDNA达沙替尼β-D-葡萄糖苷Dasatinib β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
人真皮成纤维细胞-胎儿总RNAHDF-f NA绞股蓝皂苷XLIX(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Gypenoside XLIX
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人细胞裂解液 (阳性对照) YM-201636质量规格:>98%,PIKfyve抑制剂YM201636
人真皮微内皮细胞完全培养基 100mL金石蚕苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Poliumoside
VERO E6细胞,猴肾细胞系 Lec1(卵巢细胞) 小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]金丝桃苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Hyperoside
EFNA5 Protein Canine 重组狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)6-甲氧基-2-萘乙酮(标准品)质量规格:TLC法检查2-Acetyl-6-methoxynaphthalene
特点优势:
1. 特异性:异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。