产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3947 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
单核细胞增生李斯特菌PCR检测试剂盒供应 | Listeria monocytogenesPCR | BKP3947 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
IFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白PROTEINGELLOADINGBUFFER2X,WITHPYRONINY蛋白胶上样缓冲液,2X 含派洛宁Y蛋白组学级橙粉红色液体RTsigma
INS-1(大鼠胰岛细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱拟杆菌BETA-BqTc-HCH 319-82-7
肺微内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)亚甲基蓝 Methylene blue (Dye content, ≥82%) 7220-79-3 10G 染色剂
HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酰呋核糖,英文名或英文缩写:1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose,级别:,98%,规格:10毫升
人巨细胞细胞株;Mo7eL-Threonine 5g Sigma分装
IFNA5 Others Rat 大鼠 IFNA5 / IFNaG 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸替罗非班(标准品)Tirofiban HCl质量规格:HPLC>99,标准品
人成纤维细胞完全培养基 100mL普鲁兰糖;普鲁兰多糖Pullulan质量规格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
Calu-6细胞,人退行性癌细胞 克雷伯杆菌 叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21维生素 E, 生育酚Vitamin E,dl-α-tocopherol质量规格:>98%,油状
CXCL12 Protein Canine 重组狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白司他夫定Stavudine质量规格:>98,BR,可用于细胞培养
NCI-H1299(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 司他夫定(标准品)Stavudine质量规格:>98,标准品
单核细胞增生李斯特菌PCR检测试剂盒供应Spike Others SARS SARS Spike S1 Subunit 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胞1胆碱钠;5-胞苷二1酸单钠盐Citicoline 质量规格:>98%,BR
小鼠细胞;L1210硬脂酸红霉素Erythromycin stearate质量规格:USP
tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-3A1 中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL精胺Spermine质量规格:>98%,BR
U251人细胞 Human亚精胺Spermidine质量规格:>99%,进分
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚精胺1酸盐Spermidine phosphate salt hexahydrate 质量规格:>98%(T),进口原装
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-甲氧基shēng huà shì jì容量:RT250克
人上皮细胞cDNAHPEpiC cDNA炳1晴(剧读) ccrylonitnilq
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照) 5'-三1酸鸟苷 Guanosine 5′-triphosphate (GTP... 36051-31-7 10MG 核酸衍生物
大鼠源细胞150mm培养皿shēng huà shì jì容量:2~8℃50毫克
SMMC-7721细胞,人细胞 人退行性癌细胞,Calu-6细胞 大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5Freund'sCA 10ml Sigma原装
特点优势:
1. 特异性:单核细胞增生李斯特菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。