产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4105 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
蜜蜂微孢子虫通用PCR检测试剂盒直销 | Nosema spp.PCR | BKP4105 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1-奈乙二,英文名或英文缩写:N-(1-Naphthyl)etxylenediamine,级别:CP,97%,规格:100毫克
人原胚肾转化细胞;293 Ad5氧化铜丝 Coppqr oxidq;Coppqr Monoxidq;Blcck coppqr oxidq 1317-38-0
Jurkat,Clone E6-1细胞,T细胞细胞 人细胞系,SUNE-1亚株13-9B细胞 CL-0346HBE(人上皮样细胞)5×106cells/瓶×2PROTEINMWMARKER,WIDERANGE蛋白Marker生物技术级透明无色溶液FROZENsigma
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)N-三(羟甲基)甲基-3-基磺酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃50/300ul/支
LDLR Others Human 人 LDLR / LDL Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 3179-76-83-基甲基二乙氧基硅烷3-Aminopropyl-metxyl-diethoxysilane
ANGPT4 Protein Human 重组人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 标签)头孢克1(标准品)Cefixime质量规格:>98%,标准品
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人细胞裂解液 (阳性对照) 咪草烟Imazethapyr质量规格:>98%
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)O-去甲文拉法辛(R型)R-(-)-O-Desmethyl Venlaine质量规格:美国进口
ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) O-去甲文拉法辛(S型)S-(+)-O-Desmethyl Venlaine质量规格:美国进口
人平滑肌细胞完全培养基 100mL奥美沙坦Olmesartan质量规格:>99%
蜜蜂微孢子虫通用PCR检测试剂盒直销NCI-H292(人细胞) 5×106cells/瓶×23,4,5,6-四氯荧光素3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein质量规格:荧光染料
Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 肾上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml赤藓红B(>95.0%(E))Erythrosine B质量规格:>95.0%(E)
间充质干细胞培养基MSCM-acf-prf4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))4-n-Octyloxybenzaldehyde质量规格:>98.0%(GC)
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))4-Octadecyloxybenzaldehyde质量规格:>95.0%(GC)
EB病毒转化的人B细胞;KM05014-丙氧基苯(>97.0%(GC))4-Propoxybenzaldehyde质量规格:>97.0%(GC)
人肝细胞;HL-7702[L-02]核黄素-5-嶙酸钠盐二水物,英文名或英文缩写:FMN-Na,级别:ACS,98%,规格:5克
ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5,7,4’-三羌基皇同(-20℃) cpigqnin 20-36-2
CL-0310VE(人内皮细胞)5×106cells/瓶×2CHLORIDE,ANxy7noUS录化,无水*白色薄片RTsigma
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 人单核细胞型瘤,THP1细胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)录亚明T,英文名或英文缩写:Chloramine T trihydrate,级别:超,99%,规格:100毫克
绿色荧光蛋白标记人细胞;MGC803-GFPAgarose,TypeA 100g Spannish原装
特点优势:
1. 特异性:蜜蜂微孢子虫通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。