【产品名称】: 巴氏细颈线虫PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Nematodirus battusPCR
【货号】: BKP4078

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

巴氏细颈线虫PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

rCF, 大鼠成纤维细胞 Rattus蛋黄粉shēng huà shì jì容量：100克

EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人细胞裂解液 (阳性对照) 罗红霉素 Roxithromycin 80214-83-1 100G 通用试剂

表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB羌基鳞灰石 xy7noxycpctitq 1306-06-2

DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / CD167 (aa 444-913) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) γ-MDH麦芽糖酶1克BR，20u/ul

CL-0372KATO III(人细胞)5×106cells/瓶×2靛基质NA
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照) 戊硫醇（标准品）n-Amyl mercaptan质量规格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)

人永生化表皮细胞;HaCaTAmberlite IR-120阳离子交换树脂（钠型）AmberliteIR-120质量规格：钠型

大鼠肝细胞;BRL 3A 胆管细胞型细胞，HCCC-9810细胞 C26细胞，小鼠乙酸戊酯（标准品）Amyl acetate质量规格：for GC,≥99.5%(GC)

6-10B, 人细胞系 Human苯乙酮（标准品） Acetophenone质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

CES5A Others Mouse 小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 人细胞裂解液 (阳性对照) 偶氮苯（标准品）Azobenzene质量规格：分析标准品
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 丙硫氧嘧啶（标准品）Propylthiouracil质量规格：含量测定

EB病毒转化的人B细胞;KMY0906D-核糖-5-1酸二钠盐D-Ribose 5-phosphate di salt hydrate质量规格：>85%,美国进口

CNE2细胞，人细胞(低分化) 小鼠细胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞 蚊源细胞苏木色精，苏木素Hematoxylin质量规格：进分

NCI-H1650(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2核苷酸5’-一1酸腺苷钠盐;AMP钠盐Adenosine 5‘-monophosphate  salt质量规格：>98%,BR

Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 色素细胞生长培养基M2型套装，无酚红 500mlCTP.Na2；胞苷-5’-三1酸二钠盐CTP.Na2质量规格：>95%,BR
巴氏细颈线虫PCR检测试剂盒说明书AE-1杂交瘤细胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 灭活血清Sp--腺苷 3′,5′-环单硫代1酸酯 三乙基铵盐水合物质量规格：美国进口Sp-Adenosine 3',5'-cyclic monophosphorothioate triethylammonium salt hydrate

IGF2BP2 Protein Human 重组人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 标签)2-甲基硫代二1酸腺苷质量规格：美国进口2-(Methylthio)adenosine 5'-diphosphate 3 salt hydrate

Hce-8693(人盲肠腺癌细胞(未分化)) 5×106cells/瓶×2 球状少突细胞培养基OsM腺苷-2',3'-环1酸 三乙基铵盐质量规格：美国进口Adenosine 2',3'-Cyclic Phosphate Triethylammonium Salt

神经小胶质细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)腺苷 3'-1酸 5'-1酰硫酸锂盐水合物质量规格：美国进口Adenosine 3'-phosphate 5'-phosphosulfate lithium salt hydrate

CSK Others Human 人 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物质量规格：美国进口rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide
PCR检测试剂盒

巴氏细颈线虫PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。